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染色体培养染色步骤
接种
接种后放入37°C恒温培养箱中72小时
↓
加入秋水仙素
2-8滴,放入37°C恒温培养箱中1.5小时。
秋水仙素:100ml 0.85%生理盐水加入1mg秋水仙素原液
↓
低渗
去上清液加kcl溶液低渗,然后放入37°C恒温培养箱中30-40分钟。
(低渗液0.075kcl溶液由5.587g kcl+1000ml蒸馏水室温保存,用之前半小时放置水浴箱37度温浴。)
↓
预固定
加入1ml固定液混匀后,离心(2000转,10分钟)弃上清
↓
固定液固定
加入固定液6-8ml(甲醇:冰醋酸 3;1)pH M/15 磷酸氢二钠(Na2HPO4)(9.47克/升) M/15 磷酸二氢钾(KH2PO4)(9.08克/升) 5.8 8.0 92.0 5.9 9.9 90.1 6.0 12.2 87.8 6.1 15.3 84.7 6.2 18.6 81.4 6.3 22.4 77.6 6.4 26.7 73.3 6.5 31.8 68.2 6.6 37.5 62.5 6.7 43.5 56.5 6.8 49.6 50.4 6.9 55.4 44.6 7.0 61.1 38.9 7.1 66.6 33.4 7.2 72.0 28.0 7.3 76.8 23.2 7.4 80.8 19.2 7.5 84.1 15.9 7.6 87.0 13.0 7.7 89.4 10.6 7.8 91.5 8.5 7.9 93.2 6.8 8.0 94.7 5.3 8.1 95.8 4.2 8.2 97.0 3.0
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