口蹄疫O型、A型和Asia I型病毒RT—PCR分型方法的建立.docVIP

口蹄疫O型、A型和Asia I型病毒RT—PCR分型方法的建立 　　摘要 该研究旨在建立一种快速、灵敏及准确的口蹄疫病毒（FMDV）鉴定与分型的RT-PCR检测技术平台，为临床中有效准确地检测口蹄疫病毒提供有力的支持。根据NCBI中公布的FMDV序列（GenBank：JF749861.1），设计FMDV通用检测引物FP1/FP2；根据NCBI中公布的FMDV O型、A型和Asia I型序列，经过序列分析比对后，分别设计FMDV分型引物FO1/FO2、FA1/FA2和FAS1/FAS2。提取FMDV RNA后，利用随机引物扩增得到FMDV全cDNA，利用设计的引物进行PCR扩增及PCR反应条件的优化。结果表明：该研究建立的RT-PCR检测方法具有很好的特异性、敏感性和可重复性。成功建立了FMDV O型、A型和Asia I型检测及分型方法，为口蹄疫疾病的临床检测、流行病学相关调查及针对性的疫苗的制备奠定基础 　　关键词 口蹄疫；RT-PCR；O型；A型；Asia I型 　　中图分类号 S855.3 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2013）14-0249-02 　　口蹄疫（foot-and-fouth disease，FMD）是由口蹄疫病毒（FMDV）引起的偶蹄类动物共患的接触性传染病，具有流行快、传播广、发病急、危害大等流行病学特点，临床特征主要是患病动