石榴F3’H基因PCR反应体系的研究.docVIP

石榴F3’H基因PCR反应体系的研究 　　摘要：从石榴（Punica granatum L.）泰山红品种的花瓣中提取总RNA并反转录得到cDNA。设计简并引物对石榴类黄酮3’-羟化酶（F3’H）基因进行PCR扩增，筛选合适的引物及退火温度。结果表明，适合石榴F3’H基因扩增的正反向引物分别为5′-CGTNGAYGTBGTBGTBGCSKCVTC-3′，5′-TCHCCDGCWATGGCCCAHAYRTT-3′。PCR反应程序为94 ℃预变性5 min；94 ℃变性40 s，54 ℃退火45 s，72 ℃延伸60 s，共35个循环；72 ℃保温10 min。 　　关键词：石榴（Punica granatum L.）；F3’H基因；PCR 　　中图分类号：S685.99 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2013）09-2168-03 　　石榴（Punica granatum L.）为石榴科落叶灌木或小乔木，在中国已有两千多年的栽培历史，在长期的自然选择和人工栽培过程中形成了丰富的遗传多样性[1，2]。石榴不仅是人们喜爱的传统水果，也是一种优良的园林绿化树种。石榴花朵艳丽，其花瓣有单瓣、复瓣、重瓣、台阁等不同花型，红、粉红、白、黄等不同花色[3]，观赏价值极高。目前对石榴AFLP[1，2]、ISSR[4]、RAPD[5]、SARP[6]等分子标记的研究较多，