湖南省2012届高考生物复习 现代生物科技专题 第1讲 基因工程课件 新人教版选修3.pptVIP

【解析】(1)质粒切割前是双链环状DNA分子，故不含游离的磷酸基团。从图1可知，质粒上只含有一个SmaⅠ酶的切点，被该酶切割后含有两个游离的磷酸基团。 (2)G和C含量越多，热稳定性就越高。 (3)构建重组质粒时标记基因和目的基因应保持完整。 (4)只使用EcoRⅠ，则质粒和目的基因两端的黏性末端相同，用连接酶连接时，除会产生重组质粒外，还会产生质粒与质粒、目的基因与目的基因自身连接物。 (7)将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体后，含有重组质粒的个体才能吸收蔗糖。 * 金太阳新课标资源网 老师都说好! 金太阳新课标资源网 * 一、基因工程的概念及基本工具 【答案】①DNA重组　②体外DNA重组　③转基因　④遗传特性　⑤生物类型　⑥生物产品　⑦限制酶(限制性核酸内切酶)　⑧某种特定核苷酸序列　⑨特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键　黏性末端　?平末端　?DNA连接酶　?磷酸二酯键　?质粒　?小型双链环状DNA　?限制酶　?复制并稳定保存　?标记基因　?λ噬菌体的衍生物 二、基因工程的基本操作程序 【答案】?编码蛋白质　21.PCR技术　22.启动子　23.终止子　 【答案】24.农杆菌转化法　25.显微注射法　26.插入了目的基因　27.转录出了mRNA 一、基因工程的基本操作工具 1.与DNA分子相关的酶 (1)几种酶的比较 续集 　 (2)限制酶与DNA连接酶的关系 ①限制酶不切割自身DNA的原因是：原核生物中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。 ②DNA连接酶起作用时不需要模板。 2．载体 (1)作用 ①作为运载工具，将目的基因转移到宿主细胞内。 ②利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量复制。 (2)具备的条件 ①能在宿主细胞内稳定保存并大量复制。 ②有多个限制酶切割位点，以便与外源基因连接。 ③具有特殊的标记基因，以便进行筛选。 (3)种类 ①质粒：一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外，能够自我复制的很小的双链环状DNA分子。 ②λ噬菌体的衍生物。 ③动植物病毒。 【友情提醒】①一般来说，天然载体往往不能满足人类的所有要求，因此人们根据不同的目的和需要，对某些天然的载体进行人工改造。 ②限制酶切割位点所处的位置必须是在所需的标记基因之外，这样才能保证标记基因的完整性，有利于对目的基因的检测。 【例1】下列有关基因工程中限制性核酸内切酶的描述，错误的是(　　) A．一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列 B．限制性核酸内切酶的活性受温度影响 C．限制性核酸内切酶能识别和切割RNA D．限制性核酸内切酶可从原核生物中提取 【解析】本题考查基因工程中工具酶的有关知识。大部分酶的化学本质是蛋白质，少数酶的化学本质是RNA。酶的活性受到温度和pH的影响；限制性核酸内切酶的特点是能识别双链DNA中特定的核苷酸序列，可在特定的位点进行切割；限制性核酸内切酶主要是从原核生物体内分离出来的。 【答案】C 【例2】质粒作为“分子运输车”的条件是(　　) ①能够自我复制　②双链环状DNA分子　③有多个限制酶切点　④有标记基因　⑤真核细胞中没有 A．①②③④⑤ B．①②③④ C．①③④ D．②③⑤ 【解析】载体具备的条件是：有标记基因；具有多个限制酶切点；能在宿主细胞内稳定保存并大量复制。 【答案】C 二、基因工程操作程序 1．基因工程技术生产凝乳酶的过程 2．基因工程的操作程序分析 (1)目的基因的获取途径 ①从自然界中已有的物种中分离出来，如从基因组文库或cDNA文库中获取。 ②人工合成目的基因 常用的方法有反转录法和化学合成法。 ③利用PCR技术扩增目的基因 通过PCR技术可对已获取的目的基因进行扩增，以获取大量的目的基因。 (2)基因表达载体的构建 【友情提醒】①插入的目的基因的表达需要调控序列，因而用作载体的质粒的插入基因部位之前需有启动子，之后需有终止子。 ②两次使用的限制酶为同一种酶，这样形成的黏性末端碱基之间互补，便于连接。 (3)目的基因导入受体细胞 导入 生物 植物 动物 微生物 受体 细胞 体细胞或受精卵 只能是受精卵 主要是大肠杆菌 导入 方法 农杆菌转化法(或花粉管通道法和基因枪法) 显微注射法 感受态细胞法 导入