生物化学与分子生物：RNA的生物合成及调控.pptVIP

(四) RNA生物功能的多样性 1.在遗传信息的翻译中起决定作用； 2.有催化功能，现已发现多种核酶； 3.参与转录产物的加工,如UsnRNAr（剪接）,gRNA（编辑）和snoRNA（修饰）； 4.对基因表达和细胞功能有调节作用，如反义RNA对转录和翻译的抑制作用，RNA干涉对翻译的抑制作用和对mRNA的降解作用等。RNA干涉在功能基因组研究和基因治疗等方面的应用价值引人关注。 5.在进化中起重要作用。 小时序RNA 小干涉RNA Dicer酶是RNase III家族中特异识别双链RNA的一员，它能以一种ATP依赖的方式逐步切割由外源导入或者由转基因，病毒感染等各种方式引入的双链RNA，切割将RNA降解为19-21bp的双链RNAs(siRNAs)，每个片段的3’端都有2个碱基突出 (五) RNA的降解 tRNA和rRNA较稳定，更新率较低。 mRNA的降解是基因表达调节的一个重要环节，不同的mRNA半衰期相差很大，短的只有几分钟，但一些可合成组成性表达产物的mRNA，可以在多个细胞世代中稳定存在。脊椎动物mRNA的半衰期平均约为3h，细菌的约为1.5min。 原核生物的外切酶按5′-3′方向降解RNA的较多，细菌在几轮翻译后即开始降解mRNA。真核生物在poly(A)缩短后，脱去帽子结构，然后按5′-3′方向降解mRNA，也可以直接按3′ ? 5′ 方向降解。 有关RNA降解的调控机制，有待进一步的研究。 四、在RNA指导下的RNA和DNA合成 P491 （一）病毒RNA复制的主要方式 1.病毒含正链RNA，先合成复制酶，复制后合成其他蛋白质进行装配。如噬菌体Q?及灰质炎病毒。 2.病毒含负链RNA和复制酶，先合成正链，再合成病毒蛋白和复制病毒RNA。如狂犬病毒。 3.病毒含双链RNA和复制酶，如呼肠孤病毒。先复制正链，再翻译成病毒蛋白，最后合成负链，形成双链RNA分子。 4.致癌RNA病毒：如白血病病毒和肉瘤病毒，先逆转录生成DNA前病毒，再转录、翻译。 （二）噬菌体Q?RNA的复制 其RNA是单链，正链，侵入后立即翻译，构成复制酶，进行复制。翻译只产生复制酶的?亚基，与宿主的三个亚基(α为核糖体蛋白，γ、δ均为肽链延长因子)构成完整的复制酶。先以正链为模板合成负链，再根据负链合成正链。合成负链时需要宿主的两个蛋白因子，合成正链则不需要，所以可大量合成。 病毒的蛋白质合成受RNA高级结构的调控 (三) RNA的逆转录(逆转录酶) P494 1970年发现放线菌素D抑制某些RNA病毒的复制，说明病毒的复制与DNA合成有关，用嘌呤霉素抑制宿主的蛋白质合成，逆转录病毒仍可繁殖，说明逆转录酶是由病毒合成的，随后从病毒分离得到的逆转录酶能够以RNA为模板，以dNTP为原料，合成RNA-DNA杂合链,其核糖核酸酶H活力可以水解RNA-DNA杂合链中的RNA链，随后，在DND指导的DNA聚合酶作用下，合成双链DNA分子。 LTR：长末端重复序列，Gag：种群特异性抗原（group specific antigen)，pol：聚合酶（polymerase)，env：被膜蛋白（envelope)，Ψ是逆转录RNA包装为病毒所必需的。 一些逆转录病毒的基因组 The retroviral life cycle proceeds by reverse transcribing the RNA genome into duplex DNA, which is inserted into the host genome, in order to be transcribed into RNA. Retroviruses (HIV) bud from the plasma membrane of an infected cell. Zn-指基序 Cys和His与 Zn的协同作用 二级结构 （2）Zn-指C2H2基序与DNA的相互作用。3个Zn-指基序与DNA半个螺旋的大沟结合，Zn-指的螺旋指向大沟，与大沟的碱基对相互作用。 Cx家族Zn-指蛋白质的特征 雌激素受体的DNA结合基序，其二级结构无β-片层结构。 Cx类雌激素受体有多个锌指结构域 雌激素受体的DNA结合结构域与DNA辨认元件的相互作用。 （3）亮氨酸拉链C/EBP*的C- 末端螺旋结构，Leu处于螺旋的一侧。 *即CCAAT and Enhancer Binding Protein,从小鼠肝脏提取的一种耐热的DNA结合蛋白。 11种特异性结合蛋白碱性区和亮氨酸拉链区序列的比较 亮氨酸拉链二聚体bZIP蛋白质的