芦丁的提取分离鉴定.docVIP

综合化学实验: 芦丁的提取分离和鉴定 芦丁简介: 芦丁（Rutin）又名芸香苷化学式: C27H30O16·3H2O，是一种浅黄色针状结晶有机化合物，广泛存在于自然界植物中，是一种被人们广泛使用的有机天然产物。目前已发现含有芦丁的植物至少在70种以上，常见的如烟叶、槐花、荞麦和蒲公英中均有不同含量。尤其以中药槐米（豆科、槐属，槐树Sophora japonica的花蕾）和荞麦中含量最高，因此槐米可作为大量提取芦丁的天然植物原料。生物类黄酮的功能防止维生素C被氧化而受到破坏，增强维生素功效；增加毛细血管壁强度，防止瘀伤。有助于牙龈出血的预防和治疗，有助于因内耳疾病引起的浮肿或头晕的治疗等补充知识:关于苷（gān）和甙 dài : 苷类（glycosides，旧称甙）又称配糖体，是糖或糖的衍生物的半缩醛羟基与另一类非糖物质中的羟基以缩醛键（甙键）脱水缩合而成的环状缩醛衍生物，水解后能生成糖与非糖化合物。目前国际上通用“苷”如“皂苷”，而过去习惯使用的中文名称“甙”目前已不再使用如“皂甙”现统称“皂苷”。2、掌握化学鉴别试验、苷水解、衍生物制备、熔点和薄层层析检测等手段在苷类结构鉴定上的作用。 3、通过UV、IR、HNMR和MS图谱解析，了解光谱方法黄酮类化合物结构鉴定中的作用。 二、已知重要成分性质： 1. 芦丁（rutin）：分子式C27H30O16·3H2O，为浅黄色针状结晶物，mp174～178℃（含三分子水）；100mmHg和110℃加热12小时后，变为无水物，115～117℃软化，214～215 ℃发泡分解。难溶于乙醚、三氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯、丙酮、二硫化碳、苯等，易溶于吡啶，甲酰胺特别是碱液。通常常用的溶剂下其溶解情况为：较难溶于冷水（1：8000～10000），冷乙醇（1：650）；可溶于热水（1：180～200）以及冷甲醇（1：100）；较易溶于热乙醇（1：60）和热甲醇（1：10）。 2. 槲皮素（quercetin）为芦丁的苷元其分子式为：C15H10O7·2H2O，黄色结晶，mp313～314℃（2分子结晶水），316℃（无水物）。能溶于冷乙醇（1：290），易溶于沸乙醇（1：23），可溶于甲醇、乙酸乙酯、冰醋酸、吡啶、丙酮等；难溶于水、苯、石油醚等溶剂。一般在碱水中溶解显黄色。 3. 皂苷（saponin）一般为白色粉末，mp 210℃～220℃。易溶于吡啶。能溶于甲醇（1：200），可酸水解得下列两种苷元及糖。糖为葡萄糖，葡萄糖醛酸和葡萄醛酸内酯。 （1）白桦酯醇（betulin）无色针晶，mp215～220℃，能溶于醋酸，丙酮、醋酸乙酯、甲醇、乙醇、氯仿、苯等；难溶于石油醚和水。 （2）槐花二醇（sophoradiol）无色针晶，mp219~ 224℃，溶于石油醚、苯、丙酮、甲醇、难溶于水。 （1） （2） 芦丁属于黄酮苷，分子中具有酚羟基，显酸性，因此可溶于稀碱液中，在酸液中沉淀析出，可利用此性质进行提取分离。利用芦丁易溶热水、热乙醇，较难溶于冷水、冷乙醇的性质选择重结晶方法进行精制。芦丁可被稀酸水解生成槲皮素及葡萄糖、鼠李糖，依此进行制备槲皮素。通过纸色谱及紫外光谱等可进行黄酮及糖的鉴定。芦丁酸性条件下水解的过程见下反应方程式： 三、提取分离和纯化 注1：硼砂因能与芦丁结合，起保护邻二酚羟基，不被氧化破坏的作用，实验证明，提取时加入硼砂，产品质量要好些。 注2：加石灰乳既能达到碱溶解提取芦丁的目的，还可以除去槐花米中大量的粘液质和酸性树脂（形成钙盐沉淀），但pH不能过高和长时间煮沸，因为会导致芦丁的降解。 注3：pH过低会使芦丁形成锌盐而降低收率。 ?四、芦丁的鉴定 定性反应见附录。 （一）芦丁的酸水解 称取精品芦丁2 g 置500ml烧瓶中 加2%H2SO4 200ml 加热回流1小时 放冷，静置，抽滤 酸性滤液 沉淀 中和 水洗两次，干燥 乙醇重结晶 中性滤液 称重，计算收率 浓缩 黄色细针状结晶 浓缩液 （槲皮素） （供糖的鉴定） （二）糖的鉴定纸层析鉴定：取水解母液20 ml，于上加热，同时于搅拌下加BaCO3细粉中和至中性，BaCO3后，滤液浓缩至2~3 ml，得样品液以葡萄糖和鼠李糖标准品作对照 展开剂：正丁酵醋酸水（BAW）（4：1：5）上层，显色剂：苯胺邻苯甲酸试液，喷后105℃烘10分钟。显棕红色斑点。（三）芦丁和槲皮素的薄层层析鉴定 吸附剂：硅胶G（400）以0.4 %CMC-Na）水液制板，100 ℃活化1小时。 展开剂：（1）CHCl3-MeOH-HCOOH（15：5：1） （2）CHCl3-丁酮-HCOOH（5：3：1） 显色剂：1% FeC13和1% K3[Fe（CN）6]水溶液，时等体积混和。?五、1．芦丁的定性反应 取芦丁适量，加乙醇使溶解，分成三份供下述