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- 2017-03-05 发布于贵州
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基因表达谱芯片见问题分析
基因表达谱芯片常见问题分析1 芯片实验和定量PCR的优劣比较 基因表达谱芯片实验可以对大量基因一次性进行定量研究,定量PCR则对大量基因需逐一进行定量研究。 2 在芯片制作过程中的PCR原液是否可以为客户保存 可以抽干冷冻保存一年。 3 可否用DNA和芯片杂交 不可以,因为芯片上的样品是cDNA而真核基因DNA中普遍存在內显子,核酸杂交无法顺利进行。 4 对于临床症状不明显的的遗传病,如何取样 可以从病人抽取血样或者骨髓。 5 如何保存血样 将血样中血细胞分离出来,然后-80℃低温保存。 6 脱落细胞是否都是死亡的细胞, 其中是否可以抽提mRNA 不完全是死亡的细胞, 但是mRNA的含量比较少, 建议最好用正常细胞抽提mRNA。 7 完成一张芯片的实验,需要的细胞的量是多少 需要5×106的细胞量 8 提供的电泳图和OD值如何评价mRNA的质量? 电泳图可以分析mRNA和总RNA是否降解, OD值可以判断纯度。 9 是否可以将同一症状的病例混合后抽提,看共性表达 可以。 10 芯片是否可以重复使用 不可以。 11 杂交后的芯片如何保存 避光常温保存几个星期。 12 在实验前期,如何定参照物 根据实验设计来确定使用共同参照物还是各自的参照物。 13 如何消除基因芯片实验中的个体差异? 可以使用同一样品重复芯片实验,取其共性,获得可靠的数据结果。
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