动物分子生物学验.docVIP

实验一 分子生物学仪器的使用及原理 实验目的 1.学习认识分子生物学实验室的仪器设备 2.了解分子生物学仪器设备使用的注意事项 二、主要仪器设备 普通离心机 无菌操作台 高速冷冻离心机 PCR仪 恒温振荡摇床 真空干燥箱 恒温水浴锅 紫外分光光度计 微波炉 微量移液器 Eppendorf管 高压灭菌锅 电泳仪 凝胶成像系统 紫外仪 三、实验报告要求 写出分子生物学主要仪器设备的使用注意事项 实验二：质粒（pEGFP-N1）的提取与酶切 一. 实验目的了解碱裂解法提取质粒的基本原理和主要应用，掌握碱裂解法提取质粒的实验方法和各种试剂在提取过程中的作用。二. 实验原理碱裂解法是利用细菌染色体DNA与质粒DNA结构的大小差异来分离质粒DNA的。碱性（pH 12.012.5）条件可以破坏碱基配对，宿主和质粒DNA的碱基之间的氢键被破坏。当条件恢复正常时（加入酸性试剂中和），共价闭合环状的质粒DNA会迅速准确地恢复配对，重新形成完全天然的超螺旋分子；而较大的细菌染色体DNA分子则难以复性，会交联形成不溶于水的线团结构，缠绕附着在细胞壁碎片上，离心时易被沉淀下来，而质粒DNA则留在上清液中，用异丙醇沉淀、70 %乙醇洗涤即可获得质粒DNA。三. 仪器设备 微量取液器（2 μL；20 μL；200 μL；1 000 μL），tip头，手掌型离心机，1.5 mL离心管, 恒温水浴，制冰机，