细胞培养基和发酵中氨基酸的检测.docVIP

细胞培养基和发酵液中氨基酸的检测 摘要：本文建立了一种采用离子色谱法，积分脉冲安培检测器测定细胞培养基和发酵液中的氨基酸的方法。选择的色谱条件为：采用AminoPac PA10分析柱和AminoPac PA10保护柱，水、醋酸钠和氢氧化钠缓冲溶液梯度淋洗，积分脉冲安培检测。该方法检测限（S/N=3）为 0.8-4.0 μg/g，氨基酸在100mM（1.0nmol）以内都有线性，RSD0.15–0.69%，可用于具体样品的检测。 关键词：离子色谱；氨基酸；AminoPac PA10 大多数氨基酸具有弱发光基团，需在高浓度时才可用紫外吸收检测。发酵液或细胞培养基中的许多成分也具有发色团，用吸收法检测时它们的吸收会干扰氨基酸的直接检测。氨基酸、糖类、乙二醇、乙醇、胺、含硫化合物都能够发生氧化反应，因此，可以用安培法直接检测这类物质。安培检测法对在特定电压下发生氧化反应的分析物具有专一性，同时在此电压下，其它所有化合物都不能被检测。积分脉冲安培法检测（IPAD）是一种强大的检测技术，它有很宽的线性范围和很低的检测限。AAA-Direct.将阴离子交换（AE）和IPAD两种方法结合起来。AminoPac PA10是一种高效阴离子交换柱，用它可以分离所有常见氨基酸。对同时含有糖和氨基酸的成分复杂的样品，如细胞培养基和发酵液，利用AAA-Direct可以同时检测其中的糖、乙二醇、糖醇