4DNA--重-酶切和连接.pptVIP

QA 关于质粒提取结果的分析 QA 关于实验中的安全问题 关于酚-氯仿-异戊醇分层问题：下层作用问题：酚变性蛋白 氯仿去除脂类，除酚 异戊醇消泡，减少表面张力剪切 关于酚：下层； 氧化判断 基因重组－酶切和连接 每100uL溶液加入500uL溶胶液,混匀。 将液体转移至吸附柱，12000rpm离心30秒，去除废液 漂洗:向吸附柱的正中央加入500uL漂洗液，12000rpm离心30秒，去除废液。重复一次。 空柱12000rpm离心2min，以彻底去除废液 将吸附柱置于一新的干净无菌的1.5mLEP管中，向吸附柱的正中央加15uL无菌水，室温放置5分钟。12000rpm离心30秒，以洗脱DNA。 再次向柱子的正中央加5uL无菌水，室温放置5分钟；12000rpm离心2分钟。合并回收液。 SYBR检测回收产物 * 预实验结果 载体 （3.65kb） 1 2 3 PET Blue质粒DNA的琼脂糖电泳（1%） Lane1：sample 1 Lane2：sample 2 Lane3：sample 3 一条带 杂带 预实验结果 PET Blue质粒DNA的琼脂糖电泳（1%） Lane1：sample 1 Lane2：sample 2 Lane3：sample 3 两条带 三条带 DNA分子的大