Sp1基因与白血病的研究进展.docVIP

90×35=31分。叙述清楚，逻辑性较强。 Sp1基因与白血病的研究进展 丘国彬 200671149 06本硕四班 指导老师：蒋纪恺 摘要 转录因子Sp1是存在于哺乳动物细胞中的一种基因调控锌指蛋白，它特异性地结合GC盒启动因子，选择性地活化从含功能识别位点的基因到mRNA的转录，它的c端含有3个连续的cys2His2型的锌指。有许多蛋白能与sp1作用，它是通过磷酸化和在单糖乙酰葡萄糖胺的O键的糖基化而被修饰的。在与白血病的关系的研究中，也有部分成果：1.Sp1能调控PML(promyelocytic leukemia早幼粒细胞白血病基因)的转录，降解PML-RARα蛋白诱导APL细胞分化[2]。它的c端含有3个连续的cys2His2型的锌指。 锌指(Zinc finger)，是存在于真核细胞转录因子中的重要的DNA结合蛋白结构域(DNA-binding protein domain)之一。 1.Sp1的结构与功能 （Fig1 sp1的结构区。右侧标明为氨基酸的含量和分子量） Sp1基因编码105kDa的蛋白质，2000年从cDNA序列推算出了人类Sp1氨基酸序列[3]。Sp1蛋白被分为数个功能亚区[4](Fig.1)。转录激活区包括A、B两个亚区，当通过DNA结合区与DNA结合后，它们都可以发挥促转录活性。A、B亚区均为富含谷氨酰胺的区域，靠近谷氨酰胺富集区的是丝/苏氨酸富集区，与翻译后修饰有关[5]。C区是高电荷氨基酸富集区，C区的球头结构在Sp1与甾醇调节因子结合蛋白发挥协同激活时有着重要的作用(Fig.1)[6]。C区的羧基末端有Sp家族的标志性区域—特征式的三个Cys2His2锌指结构。它们是与DNA上特异性富集GC的启动子元件结合必须的结构。羧基末端的D区是A、B区发挥协同激活所必须结构[9,11]。Harrison于2000年在Sp蛋白的氨基端鉴定出高度保守的Sp盒(SPLALLAATCSR/KI)[7]。它包含了一个内在的蛋白水解切割位点，靠近Sp1蛋白酶体依赖降解靶点。据推测，Sp1结构中的PEST序列位于富含电荷的C区，这一结构是抑制蛋白水解作用的潜在位点[8]。 2.与Sp1作用的蛋白 Sp1是通过与其他蛋白的相互作用来调节基因表达的。Sp1的所有蛋白结合位点已经被证实了(见下表)。 Sp1经它的D结构域而形成高序复合物的能力通过与多位点的结合而产生了协同的转录激活。投射电子显微技术证实Sp1首先形成四聚体，之后在DNA结合位点多个四聚体聚集[9]。当Sp1形成一个多聚体时就为与蛋白质相互作用提供了多位点。 3.Sp1的修饰 Sp1是通过磷酸化和在单糖乙酰葡萄糖胺的O键的糖基化而被修饰[10] Sp1与白血病 1.Sp1与PML 瞬间转染实验显示的转录受Sp1的调控，而PML蛋白能以剂量依赖的方式抑制这种Sp1依赖的启动子活化。其机理可能是：PML通过其卷曲螺旋区和Sp1的C末端区(DNA结合区)结合，从而特异地破坏Sp1和DNA的结合。因此，PML与Sp1的相互作用可能代表一种对EGFR和其他Sp1靶启动子转录负调节的新机理转基因小鼠研究显示由特异性染色体t(15;17)易位产生的PML-RARα蛋白是APL的重要发病基础。相应地，降解该融合蛋白可能是某些因素诱导APL细胞分化。例如，于文强等［］报道针对PML-RARα融合基因的反义寡核苷酸(AS)能够抑制APL细胞系的生长，并诱导其分化。EEN(extra??eleven??nineteen）EEN是一个新的人类急性白血病相关基因在一例儿童急性髓性血病中，克隆了一个与hrx 基因融合的新基因，命名为EEN，并应用荧光染色体原位杂交技术将该基因定位于染色体l9pl3上。研究人员进一步解析了EEN基因的包括’调控区域与转录起始位点（transcriptionstart?site，TSS）在内的基因组结构特征。研究结果表明，细胞转录激活因子Sp1可以结合在EEN启动子的guanine-cytosine(GC)–stretch上，而且对于正常EEN的表达起着关键性的作用，而白血病相关融合蛋白AML1-ETO可以通过一个AML1结合位点异常反式激活（transactivate）EEN基因。众所周知，过量表达的EEN表现出致瘤特性（oncogenic?properties）[15,16]。Sp1通过其三个“锌指结构”与Topo IIα、β启动区的GC/GT盒结合，增强Topo II mRNA的转录，上调Topo II的表达[17]，而Sp3同样含有三个可与GC/GT盒结合的“锌指结构”，可与Sp1竞争性结合GC/GT盒位点，但Sp3的转录活性较低，因此竞争性抑制了由Sp1介导的对Topo II启动子的促转录活性，下调Topo