确定抗性基因的分子标记分解.ppt

确定抗性基因的分子标记 报告人：刘昌来 SSR标记 通过其重复次数的不同以及重叠程度的不完全而造成每个座位的多态性。SSR标记多态性丰富，重复性好，其标记呈共显性，分散分布于基因组中。 建立SSR标记必须克隆足够数量的SSR并进行测序，设计相应的PCR引物。其一般程序如下：①建立基因组DNA的质粒文库；②根据欲得到的SSR类型设计并合成寡聚核苷酸探针，通过菌落杂交筛选所需重组克隆。如欲获得(AT)I／(TA)nSSR则可合成G(AT)n作探针，通过菌落原位杂交从文库中筛选阳性克隆；③对阳性克隆DNA插人序列测序；④根据SSR两侧序列设计并合成引物；⑤以待研究的植物DNA为模板，用合成的引物进行PCR扩增反应；⑥高浓度琼脂糖凝胶、非变性或变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测其多态性。 重组连锁 分子标记遗传作图 近等基因系 * 连锁的形式：(1:2:1)-(1:2:1), (3:1)-(1:2:1), (3:1)-(3:1), *