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实验四精液的冷冻保存
实验四 精液的冷冻保存
1、稀释液的配制
（1）天秤分别称取乳糖5.35g、柠檬酸钠0.04g，放入干净的烧杯中，然后加入蒸馏水50mL。搅拌混合均匀，加盖，置于水浴锅中隔水煮沸消毒10，取出冷却备用。 （2）天秤分别称取青霉素0.0685g，链霉素0.041g置入以上所配制的乳糖-柠檬酸钠液中，再用注射器取甘油4.8mL和蛋黄10mL加入其中，反复抽打，使其混合均匀，便成稀释液。 2、精液的稀释与分装
（1）精液洗稀释方法同上，按1：3～5的比例进行稀释，然后镜检精子活率。 （）取0.25mL塑料细管进行稀释精液的分装、封口和标记。
3、降温平衡 将分装好的精液用4～8层纱布包裹好，装于塑料袋中，置入4～5恒温冰箱中平衡2～3h。而后镜检精子的活率，要求活率不低于0.6，始供制冻。
（1）将小液氮罐、泡沫盒或者其它冰壶用小量液氮预冷2min，然后装入液氮约7成满，并将制冻用的铁架子平稳地固定于离液氮面约2～3cm处，加盖预冷。
（2）揭开壶盖，先将细管表面的水分擦干，摊放在冷冻架上，单层摆放，加盖2～3min，然后浸入液氮中保存（1）将消毒过的小烧杯加入温水37～40℃。
（2）用 畜别 公畜号数 射精量 颜色 混浊度 密度 PH值 原精液活率 稀释后活率 冻前活率 解冻后活率 精子复苏率 备注 2、为了提高解冻后的精子活率（即复苏率），你认为应注意哪些事顶？
3、在此次实习中，你认为在操作过程中存在着什么问题，应如何改进？
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