实验3ELISA法测定乙肝概述.pptVIP

实验七 ELISA法测定乙肝 ：是指用可微量测定的标记物（放射性核素、荧光素、酶等）对抗原或抗体进行标记，并在标记免疫物质反应结合后，测定结合物中的标记物来反映抗原-抗体反应的检测技术。 目前最常用的是酶标记免疫技术、荧光标记免疫技术、放射性核素标记技术。这类免疫标记技术的应用极大程度地提高了抗原-抗体反应的检测敏感性。 酶标记免疫技术 以酶作为标记物，通过显色反应指示抗原-抗体反应的标记技术称为酶免疫技术。 可分为酶免疫组织化学技术和酶免疫测定技术两大类。目前应用最广的为酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）,是免疫测定技术的代表。 乙型肝炎病毒表面抗原诊断试剂盒 测定原理： 采用单克隆抗-HBs（ HBs Ab）包被反应板，加入待测标本，同时加入多克隆抗HBs-HRP（辣根过氧化物酶）,当标本中存在HBs Ag时，该HBs Ag与包被抗-HBs结合并与抗HBs-HRP结合形成抗-HBs- HBs Ag-抗HBs-HRP复合物，加入显色TMB（四甲基联苯胺）底物产生显色反应，反之则无显色反应。 试剂盒组成： 1.包被好的微孔反应板 2.酶结合物 3.阳性对照 4.阴性对照 5.洗涤液 6.显色剂A、B 测定步骤 1.每孔加入待测样本50μl，设阴性、阳性对照孔，每孔加入阴性对照（或阳性对照）各一滴，并设空白对照1孔。