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分子信标技术 分子信标简介 分子信标的结构 分子信标的工作原理 分子信标的应用 前景与展望 分子信标简介 Tyagi和Krammer于1996年首次建立，目的是在液相中定量测定靶标序列。 基于荧光共振能量转移（FRET）设计的一种新型荧光标记核酸探针； 特殊的发夹结构使得其具有背景信号低、灵敏度高、特异性识别性强的特点； 广泛应用于分子生物学、生物技术、生化分析，生物医学研究和临床诊断 。 分子信标的结构 经典分子信标结构包括： 1、环状区（长度15～30个碱基的序列，能与目标分子特异结合）； 2、信标茎杆区（长度为5～8个碱基的互补序列，使得形成发夹结构）； 3、5’端荧光基团（徳克萨斯红、荧光素等染料）； 4、3’端猝灭基团（DABCYL ）。 首例分子信标结构示意图 环状区 茎杆区 荧光基团 猝灭基团 分子信标工作原理 无靶标存在下，茎环结构使得荧光基团和猝灭基团相互靠近，发生FRET，荧光猝灭，荧光背景极低。 加入靶序列后，分子信标与完全互补靶序列形成刚性并且更加稳定的双链杂交体，使得荧光基团和猝灭基团距离增大，阻止了FRET的发生，荧光恢复。 影响分子信标的因素 荧光—猝灭基团间的距离的影响： 环境pH值的影响：pH过高时，茎干区碱基对之间的稳定结合被破坏，分子信标变性，荧光基团与猝灭基团分开产生荧光。 E