A127PCREnhancers.docVIP

PCR Enhancers PCR增强剂 【产品概述】 10 x PCR Enhancers组成。PCR Enhancers能促进耐热DNA聚合酶许多DNA模板 的有效扩增，增加PCR反应的灵敏度和特异性。通过提高DNA聚合酶的热稳定性，降低DNA的二级结构。【适用范围】 灵敏度要求较高的PCR、RT-PCR、Multiplex PCR、PCR条件的优化和GC含量高的DNA扩增。 【】 PCR Enhancer 1 100 μl PCR Enhancer 2 100 μl 【存条件】 有效期 【使用方法】 由于不同的引物对模板来源、退火温度等条件存在选择，建议使用时先配好并分装PCR反应体系，向PCR反应体系中加入PCR Enhancer 1 或PCR nhancer 2（如0，0.5，1，1.5，2 μl 按需求配制数管50 μl PCR反应： DNA模板 1 μl 10 x Taq PCR buffer 5 μl 10 mM dNTP mix 1 μl 正向引物 10 μM 1 μl 反向引物 10 μM 1 μl Taq DNA polymerase 5 U/μl 0.5 μl ddH2O 补足至50 μl 模板量：10~1000 ng基因组DNA，1~30 ng质粒，或1~2 μl RT-PCR反应后的cDNA。 依次加入不同体积的PCR Enhancer 1 或2，如0.5 μl、1 μl、1.5 μl、2 μl等。 PCR反应的设置 2 min 94℃ 30 sec 55~65℃ 30 sec 25~35循环 72℃ 1 min/1 kb 72℃ 5 min B．以摸索出来的最佳PCR Enhancer浓度条件进行新的一轮PCR扩增。 注意：以举例为常规PCR反应系统，仅供参考。实际反应条件因模板、引物等的结构不同而各异，需根据模板、目的片段的大小，碱基序列和引物长短等具体情况，设定最佳反应条件根据比例放大或缩小反应体系。 M 0 0.5 1.0 1.5 2.0 3.0 μl 【补充说明】 绝大多数PCR nhancers都会降低DNA聚合酶的保真性能和特异性，因此在产量可接受的前提下，尽量选择添加最少量的PCR nhancer，必要时可采用提高特异性的措施如hotstart或touchdown技术等。任何一种PCR nhancer都不可能解决所有PCR扩增遇到的困难，这是由于PCR受多种因素影响造成的。在PCR扩增遇到困难时，应先通过设立对照实验，确定问题所在，然后判断PCR Enhancers是否可能有帮助。 【备注】 本产品仅供科研使用。在确认产品质量出现问题时，本公司承诺为客户免费更换等量的质量合格产品。在所有情况下，本公司对此产品所承担的责任，仅限于此产品的价值本身。 货号A127-10 规格：100 μl x 2 保存：-20℃ 运输：2~8℃ 使用PCR nhancer 2增加PCR产物的效果示例M：Direct-load? 1kb Plus DNA Ladder