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第一章 微生物的信息储存与传递 一、教学大纲要求 掌握脱氧核糖核酸(DNA)的结构和构象，熟悉DNA的包装与复制。 掌握RNA的结构及转录过程， 掌握基因调控的基本特点，熟悉乳糖操纵子和色氨酸操纵子调控的特点。 掌握蛋白质的四级结构，熟悉蛋白质的合成过程。 【教材内容精要】 一、DNA (一)DNA结构和构象 脱氧核糖核酸(DNA)是所有生命细胞的遗传物质，其基本重复单位是脱氧核糖核苷酸，它由一个五碳脱氧核糖、磷酸基和4种含氮碱基中的一种碱基组成。这4种碱基是胞嘧啶(C)、胸腺嘧啶(T)、腺嘌呤(A)和鸟嘌呤(G)。核苷酸通过磷酸二酯键连在一起形成分子骨架。两股反方向平行的DNA链通过非共价的氢键结合形成双螺旋。C与G、A与T相对。A：T和G：C的相互作用叫作互补碱基配对。细胞内多数DNA都是B型DNA。这是一种右手螺旋，每10个碱基成一个螺旋。DNA分子中有大沟和小沟。 (二)DNA的定量与标识 DNA的重量用道尔顿(dalton)来计，长度用微米或碱基对(bp)数来计。另一种标识方法是5′→3′方向的分子碱基序列。通常只需列出一个链的序列，另一条链可以通过互补碱基配对推算出来。 (三)单倍体／双倍体 原核与真核的DNA组装过程不同。细菌是单倍体(haploid，monoploid)，只有一个拷贝的一个染色体，分散在细胞质中。真核细胞的DNA以一定数量的染色体形式位于细胞核中，被核膜与细胞质隔开。每个染色体都有两个拷贝(双倍体)。真核细胞通过有丝分裂保证每个后代细胞都得到每个染色体的一个拷贝，通过减数分裂产生繁殖用单倍体配子。 (四)DNA的包装 DNA通过引入超螺旋，使分子结构更紧密。引入超螺旋的酶叫做拓扑异构酶(topoisomerases)。在原核生物中，DNA与蛋白质和RNA结合，形成具有独立超螺旋的40～50个环，这种结构有时叫做拟核(nucleoid)。在真核生物中，DNA与蛋白质形成染色体位于细胞核内。这里DNA—蛋白质复合体叫做染色质(chromatin)。染色质的初级结构是DNA缠绕在组蛋白上，形成一个链叫核小体(nucleosomes)。该链进一步缠绕成螺线管。第三级结构是DNA与非组蛋白支架蛋白结合，形成紧密浓缩结构，叫做分裂中期染色体。 (五)DNA复制 DNA复制是通过底物上的碱基与模板DNA链裸露的碱基互补配对，以原DNA链为模板合成新DNA链的过程。因为新的DNA链是由一条旧链和一条新合成的链组成，所以又叫半保留复制(semiconservative replication)。 1.复制泡 复制的第一阶段包括对复制起点的识别，在细菌染色体上只有一个，叫oriC。多蛋白复合体结合此位点，打开螺旋并启动复制。DNA合成发生在两条母链上，并且双向延伸形成电镜下呈“θ”型的结构，称为复制泡(replication bubble)。DNA合成所在的两个位点被称为复制叉。复制叉沿着DNA链前进，一边解开DNA双链，一边合成两条新的DNA互补链并将其后的DNA链重新形成绞链，直到两个复制叉在终止点相遇。此时复制完成的两个环形DNA仍连在一起，只有当拓扑异构酶Ⅱ在DNA双链上形成缺口后才得到两个独立的DNA分子。 2.DNA聚合酶 细菌中负责DNA合成的酶是DNA聚合酶Ⅲ，另外DNA聚合酶I也起一定作用，并参予DNA的修复过程。新合成的DNA链沿5′→3′方向延伸。DNA聚合酶还具有核酸外切酶活性，它可以从5′→3′及3′→5′双向切除核苷酸，故DNA聚合酶Ⅲ具有校对作用，使DNA合成中的错误率(亦即突变率)达到10-8以下。 3.引物 RNA聚合酶(引物酶)可在DNA合成起始点产生一段与DNA模板链配对的RNA片段(即引物)。RNA聚合酶不需3′-OH基团来起始RNA的合成，DNA的合成在DNA聚合酶Ⅲ达到一个引物后停止，DNA聚合酶Ⅲ从链上释放，而由DNA聚合酶I结合在其位点上。DNA聚合酶I具有3′→5′的核酸外切酶活性，脱氧核苷酸链上的缺口由DNA连接酶来连接。 4.前导链和滞后链 由于DNA只能在5′→3′的方向上合成，因此只有一条链可持续地合成，这条链被称作前导链。而另一条链则被称作滞后链，它只能以许多小片段(冈崎片段)的形式合成。因此滞后链需不断地起始合成，而该功能由引发体来行使，这些片段的连接是通过DNA聚合酶切除RNA引物和DNA连接酶封闭缺口来完成的。 5.真核生物的复制 真核生物和原核生物复制的最大区别是其更大的基因组和其线性排列。真核生物复制的特点：①染色体上有许多复制起点；②前导链和滞后链由不同的DNA聚合酶合成。其冈崎片段较原核生物小；③由于在滞后链上持续起始DNA的合成，其存在着不被复制的末端序列(又称端粒，telomeres)。因此染色体会不断缩短，只