选修1 专题5- 血红蛋白的提取和分离.docVIP

选修1 专题5 .3 血红蛋白的提取和分离 编写：*** 审核：*** 使用时间：2012-4 姓名 班级 学号 评价 一、学习目标 1.尝试从血液中提取和分离血红蛋白 2.了解色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理 二、学习重点、难点 1.凝胶色谱法的原理和方法。 样品的预处理；色谱柱填料的处理和色谱柱的装填。 1.1 红细胞的洗涤： （1）取材：选用哺乳动物的血液来分离血红蛋白。 （2）目的：去除杂蛋白，以利于后续血红蛋白的分离纯化 1.2 血红蛋白的释放： （1）目的：使红细胞破裂，释放血红蛋白 （2）过程： 1.3 分离血红蛋白溶液： （1）目的：经离心使血红蛋白与其它杂质分离，便于下一步纯化。 （2）过程：将搅拌好的混合液转移到离心管内，以2000r/min的速度离心10 min。 （3）结果：试管中溶液分为4层： 1.4 分离： 用滤纸过滤，除去脂溶性沉淀层， 分液漏斗中静置片刻，分出下层的红色透明液体。 2、粗分离——透析 2.1 目的：除去样品中分子量较小的杂质。 2.2 原理：透析袋能使小分子自由进出，而将大分子保留在袋内。 2.3 方法：取1ml的血红蛋白溶液装入透析袋中，将透析袋放入盛有300ml的物质的量浓度