血小板活化素在子宫颈癌化过程中扮演抑制肿瘤血管新生及基质反应.docVIP

血小板活化素在子宮頸癌化過程中扮演抑制腫瘤血管新生及基質反應角色之探討 研究生：吳銘斌 指導教授：周振陽教授、吳梨華副教授 2008 年 05 月 05 日 中文摘要 血管新生表現型的出現 血管新生作用開關 ，子宮頸癌化過程是必須的。而血管新生作用開關是由血管新生活化因子與抑制因子的所調控。第一型血小板活化素 thrombospondin, TSP-1 是一種內生性血管新生抑制因子，具有多處大分子特殊結構 domains 及多個受體。首先，我們探討在子宮頸鱗狀細胞癌化過程中，第一型血小板活化素的表現與人子宮頸鱗狀細胞癌及其癌前病變之子宮頸檢體中，時間與空間上的關聯性以及與腫瘤血管新生的關聯性。我們的結果顯示：第一型血小板活化素主要表現於子宮頸基底上皮細胞層，柵欄“第一型血小板活化素柵欄”血管新生子宮頸上皮細胞由低階鱗狀上皮內病變 LSIL 進入至高階鱗狀上皮內病變 HSIL ，柵欄崩解血管新生表現型出現同時發生的。由這樣的結果我們推測，第一型血小板活化素扮演血管新生作用的調控角色。血管新生作用開始於子宮頸癌化過程中的早期，與增殖異常的上皮組織中發生第一型血小板活化素的下調節有相關。 基質成適合腫瘤成長環境第一型血小板活化素除了已知抑制血管新生外，同時也扮演著影響其他基質細胞 如纖維母細胞 的生理作用的角色。我們假設第一型血小板活化素可抑制基質反應腫瘤成長抑制纖維母細胞的活、以及抑制基質。在本研究中我們：一：在臨床子宮頸癌及其癌前病變檢體中，檢視第一型血小板活化素的基質標記表現之相關性二：藉由免疫不全鼠 SCID mice 的異體腫瘤移植實驗，第一型血小板活化素經由抑制血管新生以及基質反應抗腫瘤成三：第一型血小板活化素經由抑制肌纖維母細胞 活化型纖維母細胞 的移動力、侵襲力基質反應。實驗結果顯示：一、在臨床病人檢體的免疫組織化學染色中發現，第一型血小板活化素消失，同時兩種基質標記α-SMA與 desmin過度表現。癌化程第一型血小板活化素與基質反應關連性。二、轉染第一型血小板活化素進入子宮頸癌細胞株 SiHa ，建立第一型血小板活化素過度表現子宮頸癌細胞株 SiHa-TSP-1 在體外抑制血管新生作用的生理功能。同時在免疫不全鼠的異體腫瘤移植實驗中，第一型血小板活化素過度表現可以經由降低腫瘤血管生長以及減少基質標記α-SMA與desmin的表現，達到抑制腫瘤生長的作用。三、轉染第一型血小板活化素纖維母細胞株 NIH3T3-TSP-1 外加純化的第一型血小板活化素至纖維母細胞株NIH3T3 中，發現第一型血小板活化素並不會直接影響纖維母細胞株 NIH3T3 之α-SMA與desmin蛋白質的表現量。transforming growth factor β, TGF-β 處理會增加纖維母細胞的活化作用及其細胞分化α-SMA與 desmin，第一型血小板活化素沒第一型血小板活化素會明顯抑制處理維母細胞株NIH3T3 後細胞移動力，並金屬蛋白酶-2 MMP-2 的活性侵襲。子宮頸癌細胞株中 SiHa-TSP-1 純化的第一型血小板活化素至子宮頸癌細胞株中時，對NIH3T3細胞株的侵襲能力沒有影響。轉染纖維母細胞株 NIH3T3-TSP-1 外加純化的第一型血小板活化素至纖維母細胞株NIH3T3 中，對NIH3T3細胞株的侵襲能力有影響。綜合這些結果，我們發現第一型血小板活化素具有抑制基質反應功能的新角色。第一型血小板活化素會抑制免疫不全鼠異體移植腫瘤形成模式中基質標記的表現，與臨床病人子宮頸病變檢體基質標記的表現相符合。第一型血小板活化素經由抑制肌纖維母細胞宮頸癌細胞移動力及侵襲能力，達到抑制基質反應並可能回復腫瘤基質反應到正常狀態。藉由控制腫瘤基質微環境，可能可以提高治療癌症的有效能力。 關鍵字：血管新生作用、第一型血小板活化素、α-平滑肌肌動蛋白、肌間線蛋白、子宮頸腫瘤、 肌 纖維母細胞、基底膜、基質作用