第二章 研究方法幻灯片.pptVIP

内容提要 第一节 显微成像技术一、光学显微镜 分辨率(resolution，R)： R=0.61λ/(nsinα/2) R=0.61x0.5/1.5=0.2μm n----介质折射率 空气：1 油：1.5 光镜与电镜的基本区别 电镜种类 1.透射电子显微镜 2.扫描电子显微镜 电镜技术的基本要求： 细胞工程技术 一、细胞培养 二、细胞融合 三、显微操作 细胞培养（cell culture） 细胞培养的用途 细胞培养的条件 细胞培养的种类 动物细胞培养的特点? 细胞培养的方法 细胞系 (cell line) 常 用 细 胞 系： 差速离心 在密度均一的介质中，不同大小的颗粒 沉降速度不同，大颗粒沉降快，先到管底， 逐步加大离心力，延长离心时间，可分离细 胞的不同组分。 沉淀小块含微粒体小泡 沉淀小块含核糖体、 病毒、大分子 2.密度梯度离心(density gradient centrifugation) 在离心管中制备由上到下逐渐增加密度的蔗糖溶液（5%—20%），形成密度梯度，细胞匀浆放最上面，这样不同组分以不同速率沉降，形成不同的沉降带，分别收集，进行分析。 细胞组分的分析方法 一、组织化学和细胞化学法 二、免疫化学法 三、分子细胞生物学技术 一、组织化学和细胞化学法 二、免疫化学法 蛋白印迹法(western blot