第十章 蛋白质和氨基酸的测定16237课件.pptVIP

1．原理： 利用蛋白质的特有基团 │ R （— NH—CH—CO） 对紫外光有吸收作用，在280 nm下，吸光度与蛋白质浓度成直线关系，求含量。 （五）、紫外吸收法 2．适用范围： 常用于生物化学工作，因为干扰因素多，故在食品分析领域应用不广泛。 3．主要仪器： ① 紫外分光光度计； ② 离心机：3000-5000 r/min 4．操作：用凯氏法测定标样做标准曲线。 第五节 氨基酸的定性测定 第六节 氨基酸定量测定 1. 原理： 氨基酸本身有碱性 （-NH2-），又有酸性（-COOH），成中性内盐，加入甲醛溶液后，与-NH2-结合，碱性消失，再用强碱来滴定-COOH基。 2．特点： 适用于发酵工业，如发酵液中含氮量，其发酵过程中氮量减少情况等。适于食品中游离氨基酸的测定。 一．氨基酸的一般定量测定 （一）甲醛滴定法 3．双指示剂： ① 40%中性甲醛溶液：以百里酚酞作指示剂，用 氢氧化钠将40%甲醛中和至蓝色。 ② 0.1%百里酚酞乙醇溶液； ③ 0.1%中性红50%乙醇溶液； ④ 0.1 mol/L 氢氧化钠标液。 （一）甲醛滴定法 （一）甲醛滴定法 4. 操 作 （二）茚三酮的比色法 原理：氨基酸在一定条件下与茚三酮起反应，生成蓝紫色化合物，可比色定量。 二．个别氨基酸的定量测定 8种氨基酸的定量测定方法：P14