14-1 血清实验技术.pptVIP

第一节 血清学反应概论 一、血清学反应的一般规律 范德华力 抗原抗体互补空间关系有助于该力发挥作用。 静电引力 氨基与羧基 氢键结合力 大于范德华力 疏水作用 抗原抗体分子上非极性氨基酸，提供的作用力最大 比例适合才出现最强的反应。沉淀反应 抗原抗体反应的等价带: 最适比时，抗原抗体结合充分，沉淀物形成快而多，上清中存在少量游离。 带现象：如抗原或抗体过剩，其结合价不能相互饱和，则抗原与抗体仅能形成小分子的复合物，不出现肉眼可见的反应。 非共价键结合，一定条件下可解离 结合强度取决于特异性抗体Fab片段与抗原决定簇立体构型的吻合程度 稀释和冻融可使复合物解离 解离与否：1、亲和力；2、环境因素 （pH、离子强度） 第一阶段：特异性结合；时间短，数秒到数分钟 第二阶段：可见反应阶段，表现为凝集、沉淀等可见反应；时间长，数分钟到数日 二、血清抗体的制备原则 1.免疫动物的选择 选择动物时应考虑以下因素： ①抗原来源与动物种属的关系。抗原的来源与免疫动物种属差异越远，其免疫源性越强，免疫效果越好，而同种系或亲缘关系越近，免疫效果越差。 ②动物个体的选择。适龄、健康、体重符合要求的正常动物（以雄性为佳）；抗体需要量少时，选用家兔、豚鼠和鸡等小动物；抗体需要量大时，可选用绵羊、山羊、马、驴等大动物。 2.抗原及佐剂 (1) 免疫原