第八小组电泳浅析.pptVIP

 electrophoresis 415宿舍 三，影 响 因 素 核 酸 电 泳 A 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 ⑴设备与试剂： 水平型可制低浓度凝胶，且制胶与加样都较方便，故应用较广泛。 （2）制胶： 用缓冲液配制琼脂糖凝胶溶液，快速地彻底融化，冷至55℃时加入溴化乙锭（EB）至终浓度为0.5μg/ml，然后将其注入玻璃模子中，厚度依样品浓度而定。 注胶时，梳齿下端距玻璃板0.5-1.0mm，待脱凝固后，取出梳子，加入适量电极缓冲液使板胶浸没在缓冲液下1mm处。 ⑶样品制备与加样： 溶解于TBE或THE内的样品应含指示染料（溴酚蓝或桔黄橙），也可使用2.5％Fico Ⅱ增加比重，使样品集中，每齿孔可加样5-10μl ⑷电泳： 一般电压为5-15V/cm。对大分子可用电压5V/cm。最好在低温条件下进行。 根据指示剂泳动的位置，判断是否终止电泳. 　染色：将凝胶浸入含有EB(0.5ug/ml)的电泳液中，室温下30-45min。染色完毕后通常不需要脱色。在检测小量DNA(10ng)时，需要脱色。 A 纸 电 泳 1)纸电泳 就是把样品以带状加在滤纸内来检测其移动和分离的方法。 常用以分离性质相似的物质，