豇豆萎凋病之生物及化学防治.doc

豇豆萎凋病之生物及化學防治 Biological and Chemical Control of Fusarium Wilt of Asparagus Bean 研究生：朱世宏 Ju, Shi-Hung 指導教授：何婉清 Ho, Wang-Ching 【摘要】 由Fusarium oxysporum f. sp. tracheiphilum 所引起的豇豆萎凋病是豇豆生產最主要的限制因子，目前尚無有效的防治措施。本試驗即嘗試利用S-H soil amendment 來進行本病害之防治效果評估。確Fusarium oxysporum，經由柯霍氏法則 Koch’s postulates 則證實F2及F3對青皮三尺豇豆的病原性後，再同時比較F2及F3兩菌株間致病力的差異，由結果顯示，F3為致病力最強之菌株，在108 spores / g soil的接種濃度下，豇豆在接種35天後，其植株死亡率可達83％，但接種F2的豇豆其死亡率卻只有27%。在進行F3菌株的生理試驗時發現，F3在PDA培養基上菌絲直線生長的最適溫度範圍為20-28℃，但分別以28及24℃為其菌絲生長最快及產孢量最高的培養溫度；F3在28℃下培養在芹菜組織 CT, celery tissue 培養基時，其產孢量雖只有F3在24℃下培養在PDA平板上的1/3，但因病原菌會在芹菜組織內產生厚膜孢子，因此以CT培養基為病原菌接種源之供試培養基。在進行接種源密度對豇豆發病之影響時，發現當病原菌接種源密度在106 spores / g soil 時，便可引起豇豆萎凋病的發生，當接種源密度達到108 spores / g soil時，豇豆在接種30天後的植株死亡便高達87％。2,000倍的25%撲克拉水基乳劑等殺真菌劑的抑菌效果時，發現以2,000倍的撲克拉錳的效果最佳，可完全抑制病原菌菌絲的直線生長，以及能將孢子的發芽率由對照的96%降至57%。供試之抑菌中藥包括大黃、五倍子虎杖五倍子00倍煎汁液可完全抑制孢子發芽煎汁液峙培養，T1、T4、T5、T7、T10、T12、T14及T16等個菌株對豇豆萎凋病菌菌絲的直線生長，可達到%以上的抑制效果；T1、T4、T7、T10、T12及T16等具有強競爭優勢，除木黴菌菌株豇豆萎凋病菌所有木黴菌均沒有抗生作用；紫外光所有木黴菌以10%VA、PSA及PDA等培養基比較木黴菌產孢量時，發現木黴菌在10%PDA上的產孢量最高，其中又以T10、T12及T1T10、T12及T13菌株的產孢能力最強。由上述指標篩選出PDA培養基產孢量時發現產孢量T. harzianum；同時也觀察到T10可在病原菌菌絲上纏繞，而T12則沒有纏繞的現象。網室及田間的防治試驗則分別以2,000倍的50%撲克拉錳可濕性粉劑、五倍子及大黃500倍的水煎汁液、每毫升含有108個分生孢子的T10及T12之木黴菌孢子懸浮液、400倍的台鹽枯草桿菌或每栽培籃含有5.3公克的孫黃土壤添加物 S-H soil amendment，相當於每分地添加130公斤的孫黃土壤添加物 等項目，來進行土壤澆灌或土壤添加處理，並以沒有任何處理者則為對照，由結果顯示除撲克拉錳有明顯的防治效果外，其餘的包括木黴菌、枯草桿菌及五倍子只能降低萎凋病的發病率，卻沒有統計上的顯著差異。關鍵字：豇豆、萎凋病、Fusarium oxysporum f. sp. tracheiphilum、 harzianum、對峙培養、生物防治、Fusarium wilt of asparagus bean caused by Fusarium oxysporum f. sp. tracheiphilum is the major restriction factor of asparagus bean production. At the present time, there is no effective control method. The main purpose of the study is to develop biological and chemical methods to control the disease. F1, F2 and F3 isolates were obtained from wilted asparagus bean plants collected from the field at Jiouru and Ligang in Pingtung county in southern Taiwan. According to the morphology and pathogenicity tests three F. oxysporum f. sp. tracheiphilum F3