-分离纯化辩析.pptVIP

生物分离工程精品课程 主讲：曹学君 生物分离工程 13． 绪论 绪论 13.1 生物下游加工在生物技术中的地位 生物下游加工在生物技术中的地位 13.2 传统生物产品与基因工程产品回收方法的比较 传统生物产品与基因工程产品回收方法的比较 13.3 生物技术下游加工过程特点 生物技术下游加工过程特点 生物技术下游加工过程特点 生物技术下游加工过程特点 13.4 生物分离的流程与单元操作 生物分离的流程与单元操作 生物分离的流程与单元操作 生物分离的流程与单元操作 13.5 生物下游加工过程的选择准则 生物下游加工过程的选择准则 13.6 非蛋白类杂质的去除 非蛋白类杂质的去除 13.7 目标蛋白的表征和分析方法 目标蛋白的表征和分析方法 13.8 生物技术产品的类型 生物技术产品的类型 13.9 下游加工过程的沿革 下游加工过程的沿革 13.10 生物分离工程的发展动向 生物分离工程的发展动向 13.11 分离效率评价 分离效率评价 13.11 分离效率评价 分离效率评价 思考题： 思考题 生物分离工程精品课程 /jpkc/bbs /jpkc/bbs 曹学君 caoxj@ T: HP 生物分离工程 生物分离工程 生物分离工程：回收生物产品分离过程 原理与方法 生物技术下游加工过程（Downstream Processing） 生物分离工程 分离工程研发费用与成本 研究费用： 50%以上 产品成本： 40-80% 人力物力： 70-90% 生物分离工程 传统产品 (1) 小分子（少数工业用粗酶） (2) 理化性质清楚 (3) 易于放大 基因产品 (1) 大分子 (2) 胞内 (3) 不稳定 (4) 放大困难 生物分离工程 生物产品特点： ① 产物浓度低的水溶液 (原因：a 氧传递限 制；b 细胞量;c 产物抑制 ② 组分复杂(a 大分子;b 小分子;c 可溶物;d 不可溶物;e 化学添加物 ③ 产物稳定性差(a 化学降解(pH , 温度); b 微生物降解 （酶作用， 染菌） ④ 分批操作，生物变异性大 ⑤ 质量要求高 （药品或食品） 生物分离工程 生物分离工程 生物分离工程 ① 细胞回收技术: 絮凝，离心，过滤，微过滤。 ② 细胞破碎技术: 球磨，高压匀浆，化学破碎技术 ③ 初步纯化技术: 吸附剂，离子交换，沉淀（盐析 法，有机溶剂沉淀，等电点，沉淀剂），溶剂萃 取，两水相萃取，超临界萃取，逆胶束萃取，膜 分离技术 ④ 高度纯化技术: 各类层析，亲和，疏水，聚焦，离 子交换，结晶 ⑤ 成品加工：浓缩，除菌与热原，喷雾干燥，气流干 燥，沸腾干燥，冷冻燥 生物分离工程 生物分离工程 生物分离工程 ① 步聚少 ② 次序合理 ③ 产品规格 （注射，非注射） ④ 生产规模 ⑤ 物料组成 ⑥ 产品形式 固体 适当结晶， 液体，适当浓缩 ⑦ 产品稳定性 ⑧ 物性 溶解度， 分子电荷，分子大小，功能团，稳 定性，挥发性 ⑨ 危害性 ⑩ 废水处理 生物分离工程 （1） DNA A 阴离子交换（pH 4.0) B 亲和层析（不被吸附） C 疏水层析 （2）热原 （蛋白质溶液中的去热原） A 生产过程无菌 B 所有层析介质无菌 C 所用溶液无菌 D 亲和层析（多粘菌素） （3）去病毒 A 加热 （60 C) B 过滤 C 灭活剂 生物分离工程 （1） HPLC （2） SDS（3） 氨基酸顺序分析 （4） 氨基酸，肽图，免疫化学 （5） 与标准品对照分析 生物分离工程 按分子量大小 小分子产品：（小于1000）抗生素，有机酸，氨基酸 大分子产品：（大于1000）酶, 抗体，多肽，蛋白质 按产品所处的位置 细胞内: 胰岛素，干扰素，重组蛋白质 细胞外：抗生素，胞外酶