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基因工程的课堂应用试题2016 一 真题 1 根据基因工程的有关知识，回答下列问题： （１）限制性内切酶切割ＤＮＡ分子后产生的片段，其末端类型有　　　和　　　。 （２）运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下： 为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是　　　。 （３）按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即 DNA连接酶和 DNA连接酶。 （４）反转录作用的模板是　　　，产物是　　　。若要在体外获得大量反转录产物，常采用　　　技术。 （５）基因工程中除质粒外， 和 也可作为运载体。 （６）若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是 。 据图回答： （1）过程①酶作用的部位是 键，此过程只发生在非结合区DNA，过程②酶作用的部位是 键。 （2）①、②两过程利用了酶的 特性。 （3）若将得到的DNA片段用于构建重组质粒，需要过程③的测序结果与 酶的识别序列进行对比，确定选用何种酶。 （4）如果复合体中的蛋白质为RNA酶聚合，则其识别、结合DNA序列基因的 。 已知甲种农作物因受到乙种昆虫危害而减产，乙种昆虫食用某种原核生物分泌的丙种蛋白质后死亡。因此，可将丙种蛋白质基因转入到甲种农作物体内，使甲种农作物获得抗乙种昆虫危害的能力。回答下列问题： （1）为了获得丙中蛋白质的基因，在已知丙种蛋白质氨基酸序列的基础上，推测出丙中蛋白质的 序列，据此可利用 方法合成目的基因。获得丙中蛋白质的基因还可用 、 方法。 （2）在利用上述丙中蛋白质基因和质粒载体构建重组质粒的过程中，常需使用 酶和 。 （3）将含有重组质粒的农杆菌与甲种农作物的愈伤组织共培养，筛选出含有丙种蛋白质的愈伤组织，由该愈伤组织培养成的再生植株可抵抗 的危害。 （4）若用含有重组质粒的农杆菌直接感染甲种农作物植株叶片伤口，则该植株的种子 （填“含有”或“不含”）丙种蛋白质基因。 肺细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细胞实表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图１。 请回答： （１）进行过程①时，需用 酶切开载体以插入let-7基因。载体应用RNA聚合酶识别和结合的部位，以驱动let-7基因转录，该部位称为 。 （２）进行过程②时，需用 酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于传代培养。 （３）研究发现，let-7基因能影响RAS的表达，其影响机理如图２。据图分析，可从细胞提取 进行分子杂交，以直接检测let-7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中 （RASmRNA/RAS蛋白）含量减少引起的。 8 天然酿酒酵母菌通常缺乏分解淀粉的酶类，用作发酵原料的淀粉需经一系列复杂的转化过程才能被利用。研究者从某丝状真菌中获取淀粉酶基因并转人酿酒酵母菌，获得的酿酒酵母工程菌可直接利用淀粉产生酒精。请回答下列问题： （1）将淀粉酶基因切割下来所用的工具是 ，用 将淀粉酶基因与载体拼接成新的DNA分子，下一步将该DNA分子 ，以完成工程菌的构建。 （2）若要鉴定淀粉酶基因是否插人酿酒酵母菌，可采用的检测方法是 ；若要鉴定淀粉酶基因是否翻译成淀粉酶，可采用 检测。将该工程菌接种在含淀粉的固体平板培养基上，培养一定时间后，加入碘液，工程菌周围出现透明圈，请解释该现象发生的原因。 一 基因工程高考真题 1（１）平末端和粘性末端 （２）切割产生的DNA片段末端与EcoRⅠ切割产生的相同 （３）Ｔ４　　Ｅcoli （４）mRNA 单链ＤＮＡ　　　ＰＣＲ（聚合酶链式反应） （５）动植物病毒　　λ噬菌体的衍生物 （６）未处理的大肠杆菌吸收质粒（外源DNA）的能力极弱 2 【答案】（1）氨基酸序列（或结构）（1分，其他答案合理也给分） （2）P P1 （每空2分，共4分） DNA和RNA（或遗传物质）（2分） DNA→RNA、 RNA→DNA RNA→蛋白质（或转录、逆转录、翻译）（3分） （3）设计蛋白质的结构 推测氨基酸序列（每空2分，共4分） 功能（1分） 3【答案】（1）磷酸二酯，肽 （2）专一（3）限制性内切酶 （4）启动子（1）基因　化学　基因文库　PCR（每空2分，共8分，其他合理答案也给分） （2）限制 DNA连接（每空1分，共2分） （3）乙种昆虫 （2分） （4）不含（3分）。 （1）（2） 6 【答案】（10分） （1）限制性核酸内切酶（或限制） 启动子 （2）胰蛋白 （3）RNA RAS蛋白 1 a ； a 2 基因枪法 花粉管通道法 4 耐盐基因 基一定浓度