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毛细管电泳仪长周期运行的优化探讨 　　毛细管电泳仪（CE）是20世纪80年代初迅速发展起来的一种新型分离技术，具有分离效率高、分析速度快、样品及试剂用量少等优点，是经典电泳技术和现代微柱分离有机结合的产物，具有很好的应用前景。毛细管电泳仪（简称CIA，下同）可用于分析精对苯二甲酸（简称PTA，下同）、TA中对羧基苯甲醛（简称4～CBA，下同）和对甲基苯甲酸（简称P～TOL，下同），该分析项目是衡量PTA产品出厂的重要指标，可对PTA后序加工性能进行评估。目前现有的四台毛细管电泳仪（WATERS Quanta 4000型）主要承担此项重要指标的分析任务。随着仪器运行长达10余年，分析仪器长时间、高负荷运转，出现故障概率明显增加。紧急时曾出现2台设备同时发生故障，严重影响了正常分析。同时，由于生产厂家2002年早已停产，不再提供原厂配件，仪器型号老导致部分配件难以采购或采购费用高昂等原因，造成设备维修成本过高。仪器工作环境要求比较苛刻，毛细管柱需要经常处理、更换；仪器内部机械设计精密、自动化程度较高，需要经常维护；仪器每天还承担着生产装置的正常生产分析和产品出厂等大量分析任务，需要不断优化仪器条件。 　　毛细管电泳仪结构原理 　　1.仪器结构 　　毛细管电泳仪是以高压电场为驱动力，以毛细管为分离通道，依据样品中各组分之间淌度和分配行为上的差异而实现分离的一类液相分离技术。毛细管电泳仪的基本结构包括一个高压电源，一根毛细管，一个检测器，两个供毛细管两端插入而又可以和电源相连的缓冲液贮瓶以及数据处理系统。仪器的基本结构如图1所示。 　　2.仪器工作原理 　　毛细管电泳仪所用的毛细管柱，其内表面带负电，和溶液接触时形成一双电层。在高电压作用下，双电层中的水合阳离子引起流体整体朝负极方向移动的现象叫电渗。正离子的运动方向和电渗流一致，故最先流出；中性粒子的电泳速度为“零”，故其迁移速度相当于电渗流速度；负离子的运动方向与电渗流方向相反，但因电渗流速度一般都大于电泳流速度，故它将在中性粒子之后流出，从而因各种粒子迁移速度不同而实现分离。 　　优化措施 　　1.环境 　　环境湿度影响仪器的稳定性。空气湿度大，仪器电子元件受潮易损坏，容易吸湿，造成电泳仪过电流，控制困难，仪器不稳定，常出现报警。温度高，也会导致仪器不稳，这在夏季特别容易出现。仪器环境温湿度最佳条件为：20 ℃～25 ℃，RH为50%～65%。由于每年夏季温湿度变化大，同期的仪器故障率偏高。车间及时安装空调进行除湿处理，控制操作室内环境温湿度能够达到仪器正常运行的条件，这一措施明显降低了由于温湿度原因所引起的过电流故障。 　　2.操作条件 　　（1）检测波长 　　在毛细管电泳法中，检测光程即毛细管的内径较小，使其灵敏度受到一定的限制，但该方法可利用被测组分的紫外吸收进行检测，提高方法的灵敏度。测定4～CBA和P～TOL酸含量时，检测波长通常为200 nm～260 nm。检测PTA试样时，通过全波长扫描发现，在254 nm处4～CBA和P～TOL都有较大的吸收，灵敏度较高。因此，检测波长选为254 nm。 　　（2）电压 　　毛细管两端所加的电压是影响毛细管分离的重要操作参数，当毛细管长度固定后，电场强度随着电压的增大而增大，高电场强度导致电流增加，引起毛细管电解质产生热量，谱带展宽，柱效下降。电场强度一般选择250 V/cm～500 V/cm。目前采用正负两种高压源，使用负高压源时仪器较稳定，电泳时的分离电压为18 kV效果较好。 　　（3）电解液 　　电解液配制：准确称取8.0g正庚烷磺酸钠和4.0 g正己烷磺酸钠（准至0.1 mg）于500 mL烧杯中， 加去离子水溶解，配制成2 L溶液，将该溶液用0.45 um的过滤膜过滤至2.5 L试剂瓶中，再加0.08 g十六烷基三甲基氯化铵溶液，用氢氧化锂调节PH值为10.7左右，摇匀，再将该试剂瓶用真空泵脱气（时间稍长些）。 　　电解液作用：电解液是样品在毛细管中移动的载体，降低电解液浓度，可降低电流强度，减少谱带展宽，有利于各峰之间的分离，分析时间长；提高电解液浓度，提高分析速度，分离效果差。电解液的PH值对分离选择性影响较大，它不仅影响溶质的电荷，而且也能使电渗流发生变化，对分离效率的影响也很大。用毛细管电泳法分析PTA中的杂质时，缓冲溶液一般采用水～正庚烷磺酸钠～正己烷磺酸钠混合物，电渗流改性剂为有机阳离子表面活性剂氯化十六烷基三甲基氯化氨。PTA试样为弱酸性，因此选定的缓冲溶液为碱性。 　　用缓冲溶液作为毛细管电泳法中的电解质溶液，缓冲溶液的浓度与PH值影响毛细管分离效果。现控制好溶液PH值到10.6～10.8，做好电解液脱气，确保仪器分离效果。 　　（4）毛细管柱 　　毛细管