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- 2017-06-08 发布于重庆
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TUNEL检测方法
TUNEL检测方法
——DeadEnd??Colorimetric?TUNEL System试剂盒法
检测原理: 细胞凋亡时,其DNA会产生3′-OH末端,而正常细胞则几乎没有。使用末端脱氧核苷转移酶 TdT酶 将生物素标记的核苷酸连接到DNA的3′-OH末端。再将辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素 Streptavidin?HRP 结合在此核苷酸上。Streptavidin?HRP可与过氧化物酶的底物——过氧化氢和稳定的显色剂氨基联苯胺 DAB 产生深棕色反应。即可通过光学显微镜观察到凋亡细胞。
材料
试剂盒(G7130)内容:
名称 量 说明 平衡缓冲液 9.6ml 生物素标记的核苷酸混合物 40μl 2 × 20μl TdT酶 40μl 2 × 20μl Streptavidin?HRP 40μl 0.5mg/ml DAB 20X Chromogen 200μl DAB Substrate 20X Buffer 200μl Hydrogen Peroxide 20X 200μl SSC, 20X 70ml Proteinase K 10mg Plastic Coverslips 40 2 × 20 储存条件:?
平衡缓冲液,?TdT酶,?生物素标记的核苷酸混合物,蛋白酶K?:–20°C
Streptavidin?HRP,?DAB?20X?Chro
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