培训课件-遗传与育种学实验.pptVIP

操作方法： 1.安装电泳槽 2.贮液制备 3.制备凝胶板 （1）分离胶制备： 分离胶缓冲液pH8.9Tris-HCl（TEMED）2.50mL；凝胶贮液30%Acr-0.8%Bis 5.00mL；重蒸水2.50mL ；0.14%AP 10mL 　 混匀后的凝胶溶液倒入玻璃板之间的窄缝内，加胶高度距上端口2cm为止。用注射器在凝胶表面轻轻加上一层重蒸水，用于隔绝空气，使胶面平整。约30min-60min后凝胶完全聚合，则可看到水与凝固的胶面的界线。倒去上层的重蒸水。 （2）浓缩胶的制备：浓缩胶为pH6.7 2.5%PAA，其配制方法如下： 浓缩胶缓冲液pH6.7 Tris-HCl（TEMED）1mL；浓缩胶贮液10%Acr-2.5%Bis 2mL；40%蔗糖 4mL；0.14%AP 3mL 混合均匀后加到分离胶上方，距短玻璃板上缘0.5cm处。轻轻插入样品槽模板。约2-3小时后凝胶完全聚合，轻轻取出样品槽模板，用滤纸吸去多余的液体，加入稀释10倍的pH8.3的电极缓冲液，使液面没过短玻璃板0.5cm，即可加样。 4.样品制备： 取材：鲫鱼若干条，解剖取1.肠、2.眼睛、3.卵、4.肉、　　　5.胆、6.胰、7.鳃、8.肝、9.心脏　放入冰箱保存。 提取酶：取不同组织块，加入提取缓冲液tr