纸层析法分离氨基酸剖析.ppt

纸层析法分离氨基酸 实验目的 1、掌握分配层析的原理，学习氨基酸纸层析法的操作技术 (包括点样、平衡、展层、显色、鉴定及定量)。 2、学习未知样品的氨基酸成分(水解、层析及鉴定)分析的方法。 实验原理 层析法又叫色层分离法、色谱分析法或色谱法。 1944年应用滤纸作为固定支持物的“纸层析”诞生以来，层析技术的发展越来越快，五十年代开始，相继出现了气相色谱和高压液相层析，其它如薄层层析、亲合层析、凝胶层析等也迅猛发展。层析分离技术操作简便，样品用量可大可小，既可用于实验室分离分析，又适用于工业生产中产品的分析制备。现已成为生物化学、分子生物学、生物工程等学科广泛应用而又必不可少的分析工具之一。 分配层析 分配层析法是利用不同的物质在两个互不相溶的溶剂中的分配情况不同而使之得到分离的方法。 分配层析法中不同溶质的分离取决于其在两相 (固定相和流动相)间分配系数的不同。 分配系数(K)的定义是： K=溶质在固定相的浓度(CS)/溶质在流动相的浓度(CL) 实验材料与试剂 实验试剂 1、氨基酸标准液(1mg/mL) 五种氨基酸是丙氨酸、甘氨酸、谷氨酸,脯氨酸分别配制成一定浓度的溶液。 2、展开剂是：正丁醇：甲酸：水=15:3:2