花椰菜毕业论文要点分析.docVIP

目 录 摘要 ………………………………………………………………………………………1 引言 ………………………………………………………………………………………1 1 材料与方法 ……………………………………………………………………………3 1.1材料………………………………………………………………………………3 1.2实验方法…………………………………………………………………………3 1.2.1花椰菜无菌的准备 ………………………………………………………3 1.2.2不同苗龄的外植体的获得 ………………………………………………3 1.2.3 AgNO3对不定芽分化的影响 ……………………………………………3 1.2.4不定芽的生根培养及再生植株的移栽 …………………………………4 1.3再生频率与每块外植体再生芽数的计算………………………………………4 结果分析………………………………………………………………………………4 2.1激素浓度对不定芽分化的影响…………………………………………………4 2.2不同基因型和苗龄对不定芽分化的影响………………………………………5 2.3AgNO3对外植体分化能力的影响…………………………………………………5 3小结与讨论 ……………………………………………………………………………5 谢辞 ………………………………………………………………………………………6 参考文献 …………………………………………………………………………………7 花椰菜下胚轴高频再生体系的建立 摘要：本文就NAA浓度、基因型和外植体苗龄的不同对花椰菜下胚轴再生的影响进行了初步的研究与探讨。实验结果表明：单独使用 6-BA 时，不定芽产生较少，而配合一定浓度的NAA时，不定芽分化率增加。但当NAA浓度大于0.2mg/L时，外植体分化出大量的不定根并很少有不定芽产生。只有在 2.0mg/L6-BA和 0.05 mg/LNAA 配合使用，才能达到最佳的诱导效果。 关键词：花椰菜 下胚轴 高频 再生体系 引言 花椰菜又称花菜或菜花，属于十字花科芸薹属的栽培植物，原产于地中海北岸，传入我国已有二百多年的历史。目前我国花椰菜种植面积已达35.3万km2，居世界第一位。花椰菜所含营养成分极其丰富，每10g花菜含蛋白质2.0g，碳水化合物3-4g，还有矿物质及维生素等多种营养物质，其中Vc含量居十字花科蔬菜之首。更加可贵的是，其含有多种吲哚类衍生物，可提高肝脏的芳香羟化酶的活性，能增强分解致癌物质的能力。自从首次在花椰菜愈伤组织上得到再生植株以来，花椰菜组织培养得到迅速发展，现在可以通过直接分化再生、愈伤组织再生、胚状体再生、细胞悬浮培养和原生质体再生等方式得到再生植株，而通过子叶、下胚轴和子叶节直接再生可以保持原有品质或亲本的优良性状，这为转基因的顺利进行做了充分的准备。建立高效稳定的植物组织和细胞培养的再生系统是利用农杆菌介导进行植物转基因的重要前提。本实验除了激素成分不同，还存在基因型、外植体类型及部位、苗龄、苗态、培养基和AgNO3 对花椰菜高频再生的影响。 1.基因型的影响 植物离体形态发生能力与基因型有着密切的关系，基因型对再生频率有很大影响。许多研究表明[1-2]，甘蓝型油菜较白菜型油菜容易再生与转化，并且甘蓝及其变种较白菜变种容易再生得多。有研究表明，调控芽形成的基因可能位于C基因组。因此，具有C基因组的甘蓝和花椰菜等容易再生，然而花椰菜再生体系建立的过程中，始终存在基因型决定问题。 2.外植体类型及部位 可实现再生的花椰菜外植体有子叶、下胚轴、叶片、茎段、大田植株的花蕾、花药、原生质体等，而通过子叶、下胚轴和子叶节直接再生可以保持原有品质或亲本的优良性状，虽然其对农杆菌比较敏感，但因不受时间的限制，再生率很高，且操作方便，是近年来组织培养和遗传转化应用最多的外植体来源。 3.苗龄和苗态 在进行花椰菜离体培养时，子叶、下胚轴等外植体的生理年龄也是决定离体培养能否成功的关键因素之一。不同组织由于分化程度、生理状态和处理条件等不同，其分化和脱分化的能力不同，再生的难易程度也不一样。苗龄对外植体的再生有重要的影响，原因可能是细胞在特定的生长发育时期容易进行分化和脱分化。有学者认为幼嫩的外植体更容易诱导再生芽，分化能力随着苗龄的增加而下降。一般来说无菌苗苗龄为6-7d的下胚轴为最佳外植体。苗龄太长，下胚轴导管细胞的形成不利于芽的诱导；相反，若苗龄太短，则不能获得大量的下胚轴用于实验，且不利于实验操作，容易切到生长点，形成假阳性植株。 4.培养基 建立良好再生体系的一个主要工作是筛选出最佳培养基。一般花椰菜组织培养采用MS和MSB（MS+B5有机）为基本培养基，除此之外用于