5疾病产生的分子基础概览.pptVIP

② 利用随机插入突变进行基因敲除——基因捕获法 利用某些能随机插入基因序列的病毒，细菌或其他基因载体，在目标细胞基因组中进行随机插入突变，建立一个携带随机插入突变的细胞库，然后通过相应的标记进行筛选获得相应的基因敲除细胞。 ③ What is RNAi ? RNA干扰（RNA interference，RNAi） 内源性或外源性双链RNA介导的细胞内mRNA发生特异性降解，导致靶基因的表达沉默，产生相应的功能表型的缺失现象。 转录后基因表达抑制现象的发现 ＋ CHS Gene 矮牵牛花 Jorgensen, R, 1990 RNA干扰 RNA interference, RNAi RNAi 是将一段双链的RNA 序列导入机体或细胞中, 机体或细胞中与之有同源序列的基因表达将会受到抑制, 甚至表达受到完全抑制 基因敲除技术与诺贝尔奖 三位在基因敲除技术方面进行了卓越、开拓性工作并取得了显著成就的科学家分享了诺贝尔生理或医学奖，他们是美国盐湖城犹他州大学的Marie Capecchi教授、美国北卡罗来纳州大学的Oliver smithies教授以及英国加蒂夫大学的Martin Evans教授 （5）基因诱导超表达技术 将目的基因全长序列与高活性启动子或组织特异性启动子融合，经过转化后，在诱导剂的作用下或在特定的组织细胞中，目的基因超表达，相应的基因表达产物大量积累。比较加入诱导剂前后的表型变化，从而确定目的基因在疾病发生中的作用。 三、HGP与疾病相关基因的研究 随着人类基因组草图测定的完成，宣告了“ 后基因组时代 ”的到来。功能基因组学成为研究的重心，蛋白质组学的研究受到了空前的关注，也为疾病相关基因的克隆创造了条件。 同一种细胞或组织，处于不同的状态（生理与病理等），发育的不同阶段，受到外界的不同影响时，都可能使细胞中蛋白质的情况产生相应的变化，从而产生不同的蛋白质组。蛋白质组学关注和研究的就是这些变化。 研究蛋白质与疾病相互关系的方法 ELISA 免疫印迹 免疫沉淀 蛋白质亲和层析 毛细管电泳 四、生物信息学主要研究领域 ⑴ 建立和管理各种生物信息数据库 ①核酸序列数据库 ②三维结构数据库 ⑵ 基因组序列信息的提取和分析 ①序列比对（Alignment）和结构比对 ②蛋白质结构预测 ③蛋白质编码基因的计算机辅助识别 ④非编码区分析和DNA语言研究 ⑤ 分子进化和比较基因组学 、遗传密码的起源 ⑥ 序列重叠群（Contigs）的装配 ⑶ 生物大分子结构模拟及其与疾病、药物设计 ⑷ DNA芯片和微阵列的发展 建立和管理各种生物信息数据库 各种生物数据库的建立是一切生物信息学工作的基础。 数据库是生物信息学的主要内容，各种数据库几乎覆盖了生命科学的各个领域。如 EBI 的 SRS Sequence Retrieval System 包含了核酸序列库、蛋白质序列库，三维结构库等 30 多个数据库及CLUSTALW、PROSITESEARCH 等强有力的搜索工具，用户可以进行多个数据库的多种查询。 生物信息数据库 核酸序列数据库 Genbank，美国国家生物技术信息中心的数据库（/）。 ?UCSC，分子生物实验室的数据库 （/）。 与基因组有关的数据库还有 ESTdb, GDB, GSDB OMIM ，EBI的SRS（sequence retrieval system）使用户可以进行多个数据库的多种查询。 蛋白质序列数据库有 SWISS-PROT（http://www.ebi.ac.uk/uniprot）, PIR （/）, OWL, NRL3D, TrEMBL等 蛋白质片段数据库有PROSITE（/）, BLOCKS, PRINTS等 SCOP（/scop/）, CATH, FSSP, 3D-ALI, DSSP等 * 5. 常见单基因病： 疾病名称 发病频率 ‰ 遗传方式 致病基因 典型症状 血友病A 0.1 X连锁 凝血因子Ⅷ 不规则出血 血友病B 0.03 X连锁 凝血因子Ⅸ 不规则出血 杜氏肌营养不良 0.3 X连锁 肌营养因子 肌萎缩 贝氏肌营养不良 0.05 X连锁 肌营养因子 肌萎缩 脆性X综合征 0.5 X连锁 FMR1 智力障碍 舞蹈病 0.5 常染色体显性 舞蹈病因子 痴呆 神经纤维 0.4 常染色体显性 NF-1,2 癌变 珠蛋白生成障碍性贫血 0.05 常染色体隐性 珠蛋白基因簇 贫血 镰刀细胞贫血 0.1 常染色体隐性 β珠蛋白基因 贫血, 局部缺血 苯丙酮酸尿 0.1 常染色体隐性 苯丙氨酸羟基化酶 无苯丙酮酸代谢能力 囊性纤维化 0.4 常染色体隐性 CFTR 进行性肺损伤及其他 ? 囊性纤维化病 囊 性 纤 维 化 病 囊性纤维化跨膜传导调节蛋白 CFTCR 的