激活辣椒素受体是调控下颌下腺分泌的新途径解析.ppt

激活辣椒素受体是调控下颌下腺分泌的新途径 主讲人：肖作慧 小组成员：闻雯 刘艳 激活辣椒素受体是调控下颌下腺分泌的新途径 研究背景 α-肾上腺素受体、 β-肾上腺素受体 毒蕈碱乙酰胆碱受体 制约？ 这３ 种受体为作用靶点干预 腺体分泌，存在一定的问题。 由于受体在全身各 组织器官的广泛表达，全身应用其激动剂可能会带 来一定的副作用。 WHAT IS TRPV1（辣椒素受体） 激活辣椒素受体促进下颌下腺的分泌 健康志愿者→ 自制的辣椒素含漱剂口内含漱５min→唾液和泪液的分泌↑ 健康志愿者→辣椒素霜剂涂抹于颌下区皮肤表面30min →下颌下腺的分 泌量↑ (对照组)健康志愿者→利多卡因和丙胺卡因的皮肤表面麻醉剂预处理→辣椒素霜剂涂抹于颌下区皮肤表面30min →下颌下腺的分 泌量↑ (对照组)健康志愿者→利多卡因和丙胺卡因的皮肤表面麻醉剂预处理→辣椒素受体的拮抗剂处理30min→辣椒素霜剂涂抹于颌下区皮肤表面30min →下颌下腺的分 泌量－ 离体家兔下颌下腺→灌注辣椒素→唾液剂量依赖性↑ 辣椒素临床应用 血管化自体下颌下腺移植是治疗重症角结膜干燥症最重要的方式之一 选取接受血管 化自体下颌下腺移植并获得手术成功的重症角结膜 干燥症患者 42 例，在 “休眠期”使用辣椒素含漱剂或辣椒素霜剂，可明显 促进移植腺体的分泌 ，证实辣椒素刺激可以作为 “休眠期”促进移植腺体分泌、预防导管阻塞的有效 手段之一。 由于辣椒素霜剂使用方便，安全有效，目 前已经成为临床血管化自体下颌下腺移植术后“ 休 眠期”促进腺体分泌的常规用药 激活辣椒素受体调控下颌下腺分泌的机制 增加细胞内 Ca2+浓度 调控水通道蛋白介导的跨细胞转运 调控紧密连接蛋白介导的旁细胞转运 1.增加细胞内 Ca2+浓度 激活辣椒素受体调控下颌下腺分泌的机制 增加细胞内 Ca2+浓度 调控水通道蛋白介导的跨细胞转运 调控紧密连接蛋白介导的旁细胞转运 2.调控水通道蛋白介导的跨细胞转运 调控水通道蛋白介导的跨细胞转运 我们在原代培养的乳兔下颌下腺细胞中，激活 辣椒素受体不仅可以上调 AQP5的表达，还可引起 AQP5从胞浆向胞膜的转位 。 在转染了 AQP5 质粒的人下颌下腺细胞系 （ ＨＳＧ）中，辣椒素刺激可增加细胞膜上 AQP5 的含量，并且这种作用可被 ＣＰＺ 所阻断 。 此外，在家兔自体下 颌下腺移植术后早期低分泌的腺体中， AQP5 ｍＲＮＡ和蛋白的含量均显著降低， AQP5 的膜分布受到破坏并向胞浆中弥散，而局部皮肤涂抹辣椒素霜剂可 增加移植腺体的 AQP5 表达总量及胞膜 AQP5 的表达 激活辣椒素受体调控下颌下腺分泌的机制 增加细胞内 Ca2+浓度 调控水通道蛋白介导的跨细胞转运 调控紧密连接蛋白介导的旁细胞转运 3.调控紧密连接蛋白介导的旁细胞转运 在原代培养的乳兔下颌下腺细胞中，辣椒素可 以选择性上调紧密连接分子 ZO-１、claudin-３ 和-１１ mRNA 和蛋白的表达，但不影响 claudin-１～-５ 和-７的表达； 辣椒素还可引起细胞骨架蛋白 Ｆ-actin从细 胞浆向细胞膜周的重新分布 在家兔自体下颌下腺移植术后７ ｄ 处于“ 休眠期” 的腺体中，可观察到紧密连接的宽度明显缩小，紧密连接的结构发生 破坏，紧密连接分子 ZO-１、claudin-３ 和-１１ mRNA 和蛋白的表达量明显降低，Ｆ-actin 在腺泡顶侧膜上的 表达量降低；而术后应用辣椒素治疗能够改善紧密连接的超微结构，上调上述３ 个紧密连接蛋白的表 达，并且恢复腺泡顶侧膜周 Ｆ-actin 的含量 在家兔下颌下腺组织中，辣椒素能够引起相对分子质 量为４000的示踪分子———异硫氰荧光素（FITC） 标记的右旋糖酐（ FITC-dextran）从腺泡基底侧经旁细胞途径进入腺泡腔内， 但对相对分子质量较大的４0000 的 FITC-dextran 的通透无影响，提示激活辣椒素受体能够增加下颌下腺旁细胞途径的通透性 调控下颌下腺分泌的其他可能机制 下颌下腺实质中除了腺泡细胞和导管细胞外，还包括肌上皮细胞和成纤维细胞等 已有研究认 为，肌上皮细胞既具有上皮细胞的特性也具有平滑 肌细胞的一些特性，其收缩和舒张可能在腺体唾液 的排泄中发挥重要的作用 在下颌下 腺肌上皮细胞中也存在辣椒素受体的表达，给予分 离的下颌下腺组织块进行辣椒素刺激，可以增加肌 上皮细胞中重要的收缩蛋白 ＭＬＣ２ 的磷酸化，预孵 育 ＣＰＺ 可阻断这一现象 。 该结果初步提示，激活 辣椒素受体引起的促分泌作用可能还与 ＭＬＣ２ 介导 的肌上皮细胞收缩有关 供应下颌下腺的血流量也是影响分泌的一个重 要因素 当气温较低或者不运动时，