03抗体b幻灯片.pptVIP

1965年，W. Dryer 和J. Bennet: Ig基因为双基因编码。 1976年，利根川进：V区和C区的编码基因是分离的，并在B细胞分化成熟过程中不断重排，1987年诺贝尔奖 1.定义 一个B细胞克隆在分化过程中V-D-J功能性基因片段保持不变，而发生C基因重排，使其表达的抗体分子发生H链类的改变，称为类别转换（class switching） 。 2.举例 B细胞克隆 ? IgM ? 第三节 免疫球蛋白 的合成与分泌 一、体液免疫应答与抗体的产生 1，初应答与再应答 二、免疫球蛋白的表达，装配与分泌 1，mRNA的 修饰与加工：加帽，接尾 2，膜结合型和分泌型免疫球蛋白的表达 第四节 单克隆抗体和基因工程抗体 1.定义 指由不同B细胞克隆产生的针对抗原物质中多种抗原决定簇的多种抗体混合物。如:免疫血清（含多种特异性抗体）。 2.实际意义 （1）预防、治疗感染性疾病 （2）临床诊断 1.定义 由单一克隆B细胞杂交瘤产生的，只识别抗 原分子某一特定抗原决定簇的特异性抗体。 2.特点 具有高度均一性。 3.杂交瘤细胞 骨髓瘤细胞 — 无限增殖； 免疫B细胞 — 合成、分泌特异性抗体。 4.杂交瘤技术 HAT培养基：次黄嘌 H , 氨基蝶呤 A 和胸腺嘧 啶核苷 T 。 5.实际意义 （1）抗原的纯化和结构分析 （2）细胞发生、分化及功能的阐明 （3）临床疾病的诊断和治疗 三、基因工程抗体 2、Ig多样性的产生 　2）、重排组合的多样性（主要因素） κ链：100×4 4×102 H链：250×30×6＝4.5×104 1）、众多的胚系基因（原始因素） 4×103 × 4.5×107 1.8×1011 　　（2）非模板序列的插入　增加100倍 3）、重组连接的多样性 （1）非精确性连接　增加10倍 4）、体细胞基因突变：主要是点突变 4.抗体基因的表达特点： 1）、等位基因排斥： 　　是指一条染色体上Ig重链基因的 有效重排，抑制另一条同源染色体重 链基因重排的现象。 2）、轻链同型排斥 3）、重链类别转换 　　当一个Ｂ细胞中，κ链的基因发生功能性重排后，λ链的基因重排就被阻断的现象。 　　又称同种型转换。指B细胞在受抗原刺激后，首先合成IgM，然后转为合成IgG、IgA和IgE等的现象。 IgG IFN-γ IL-4 IgE IL-5 IgA Ig的类别转换 低剂量 高剂量（+佐剂） 蛋白质抗原 所有抗原 刺抗原 高，稳定 低，易变化 抗体亲和力 IgG IgA,IgE IgM IgM IgG 抗体产生量 较多 较少 抗体产生量 1-3 5-10 抗原刺激后时间（d） 再应答 初应答 多克隆抗体（polyclonal antibody） 单克隆抗体（monoclonal antibody） 基因工程抗体 一、多克隆抗体（polyclonal antibody） 二、单克隆抗体（monoclonal antibody, McAb） * * 第二节 免疫球蛋白基因 邓辉胜 2008年 Antibody Structure and Function 瑞典首都斯德哥尔摩卡罗林斯卡医学院 利根川进 一、Ig的基因结构 一、Ig的基因结构 二、Ig基因的重排和表达 三、Ig的多样性 　　　从骨髓瘤细胞（M）和胚胎细胞（E）中提取DNA，以限制性内切酶酶解 Vκ+Cκ* Vκ Cκ* （一）实验证据 一、Ig的基因结构 E M Vκ+ Cκ探针 600万 390万 240万 E M 600万 240万 Cκ探针 Vκ Cκ Cκ+Vκ （二）Ig的基因定位和结构 κ λ Ｈ Chr 人 : 2 22 14 小鼠 : 6 16 12 1）、κ链 1 Lκ gene ~100个 小鼠~350 22aa　　 2 Vκ gene ~100个 　　 1~96aa 3 Jκ gene 5 个 97~110aa 4 Cκ gene 1个 1、L链基因的结构 κ链 轻链 Lκ 23kb 2.5kb 2）、λ链 1 Lλ 　gene ~100个 小鼠2 15~20aa 2 Vλ gene ~100个 小鼠2 1~97aa　 3 Jλ 　gene 　 6 个 98~110aa 4 Cλ 　gene 　 6个 111~214aa Lλ λ链 轻链 100 λ6 2、H链基因的结构 1 LH ~250个 小鼠300~1000 2 VH ~250个 　1－94aa 3 DH ~30个 　 95－97aa 4 JH 6个 98－113aa 5 CH 11个 LH 重 链 LH 一、Ig的基因定位