医学免疫学实验一(抗原抗体反应)课件.pptVIP

间接凝集反应 间接凝集抑制 抗球蛋白法检测IgG抗体的原理 抗球蛋白可以和IgG反应 通过搭桥作用使红细胞凝集 概 述 血型系统 Blood group system 1901年发现的人类第一个血型系统---- ABO血型系统发现者----奥地利科学家 Karl Landsteiner ABO血型系统的发现 【实验原理】 血型是指红细胞的血型，是根据红细胞膜外表面存在的特异性抗原（镶嵌于红细胞膜上的糖蛋白和糖脂）来确定的，这种抗原或凝集原是由遗传决定的 + 实验器材 1：载玻片、采血针、牙签等 2：A型和B型标准血清、酒精棉球 操作步骤 1.取载玻片，酒精消毒正面，在背面标记A和B两区 2.酒精消毒指端皮肤和采血针后，用采血针刺破皮肤，挤出少量血液，涂在玻片A、B两区，并立即用无菌干棉球压迫止血 3.在两区分别滴加一滴抗A定型试剂和抗B定型试剂，立即用牙签混匀 4.静置3分钟，观察凝聚现象，判定实验结果 实验结果 ABO血型检查临床意义 1.输血：输血前必须检查血型，选择血型相同的供血者，进行交叉配血完全相合才能输血。 2.母婴ABO血型不合引起的新生儿溶血病，主要是依靠血型血清学检查来诊断。 3.器官移植时受者与供者也必须ABO血型相符合才能移植，血型不符极易引起急性排异反应、导致移植失败。 4.ABO血型与疾病之间的联系也有一些报道，某些看来造血系统无关的疾病实际上可能与红细胞血型抗原有关。 沉淀反应 ----对流免疫电泳 沉淀反应 可溶性抗原在有适量电解质存在的条件下与相应的抗体结合，形成肉眼可见的沉淀物，称为沉淀反应 类型： 沉淀反应 环状沉淀反应 絮状反应 琼脂扩散 单向扩散 双向扩散 ＋ 电泳 火箭电泳 对流免疫电泳 单向扩散 Ag Concentration Diameter2 Ag Ag Ag Ag Ab in gel 单向扩散 双向扩散 即将抗原和抗体分别加入琼脂对应的孔中，二者会向四周扩散， 在形成白色沉淀线。 二者比例合适处 双向扩散 电 泳 定义：即带电颗粒在电场的作用下向着相反的电极移动，称为电泳。 原理：蛋白质分子在溶液中由于其末端氨基、末端羧基及侧链的游离基团而成为带电颗粒，并可在电场内移动，其移动方向取决于蛋白质分子所带静电荷。不同蛋白质分子根据其氨基酸组成及所在溶液的pH值，携带的静电荷不尽相同，致使它们在电场中的迁移率各异，从而达到分理的目的。 抗原与相应抗体的特异性结合反应称为抗原抗体反应 antigen-antibody reaction 。抗原抗体反应既可在体内作为体液免疫应答的效应机制自然发生，也可在体外作为免疫学实验的结果出现。在体内，可表现为溶菌、杀菌、促进吞噬或中和毒素等作用，有时亦可引起免疫病理损伤，在体外，依相应抗原物理性状 颗粒状或可溶性 以及反应的条件 电解质、补体等 不同，可出现凝集、沉淀、细胞溶解和补体结合等反应。 由于抗体主要存在于血清中，并且临床上多用血清做试验，所以体外实验中的抗原抗体反应曾称作血清学反应。但是随着免疫学的发展，血清学的含义已不能概括目前的研究内容，现在多以抗原抗体反应代替血清学反应一词。 * 抗原抗体结合反应是抗原决定簇和抗体分子超变区之间的相互作用，是一种分子表面的特异的可逆的弱结合力。这些弱结合力只能在极短距离内才能发生效应。因此抗原抗体结合反应的最重要的先决条件是抗原与抗体间的特定部位的空间结构必须相互吻合，具有互补性;其次，抗原决定簇与抗体超变区必须紧密接触，才能有足够的结合力，使抗原抗体分子结合在一起。 * 特异性 speecificity 是指任何一种抗原分子，只能与由它刺激所产生的抗体结合而起反应的专一性能。特异性是抗原抗体反应的最重要特征之一，是由抗原决定簇和抗体分子超变区之间空间结构的互补性决定的。抗体分子N端可变区形成大小约为3nm×1.5nm×0.7nm的槽沟，其中超变区氨基酸残基的变异性使槽形状千变万化，只有与其空间结构互补的抗原决定簇才能如楔状嵌入，其关系如锁和钥匙，因此，抗原抗体结合反应具有高度特异性。 * 比例性是指抗原与抗体发生可见反应需遵循一定的量比关系，只有当二者浓度比例适当时，才出现可见反应。以沉淀反应为例，在加入固定量抗体的一排试管中再依次加入一定体积的递增浓度的抗原进行反应时，发现随着抗原浓度的增加，沉淀很快大量出现，但超过一定范围之后，沉淀速度和沉淀量随抗原浓度增加反而迅速降低，甚至到最后不出现沉淀。沉淀反应的速度反映了参加反应的抗原和抗体浓度的适合程度，适合程度高反应快，反之则慢。通常把最迅速出现沉淀时的抗原抗体的浓度比或量比称为抗原抗体反应的最适比。 抗原抗体反应比例性的机制，可用网格学说加以说明。因为天然抗原大多是多价的，抗体至少为两价，当抗原与