肿瘤与细胞凋亡重点分析.ppt

肿瘤与细胞凋亡 TUMOR and APOPTOSIS 南开大学生命科学学院 张晓东 主要内容 细胞凋亡的概念及形态学特征 细胞凋亡的生物学意义 细胞凋亡的研究方法 细胞凋亡的诱导 细胞凋亡相关因子 细胞凋亡信号传导 肿瘤与细胞凋亡 细胞凋亡 的概念及特征 概念：1972年 Kerr and Wyllie 特征： 1. 形态学特征 2. 生化特征 细胞凋亡和坏死的主要区别 细胞凋亡的生物学意义 细胞凋亡与胚胎发育 尾芽的消失 神经系统40~70%的神经细胞会凋亡 70~95%的淋巴细胞要凋亡 疾病与细胞凋亡 AIDS 白血病 肿瘤发生 细胞凋亡的研究方法 1.根据形态学特征 光学显微镜 电子显微镜 2.根据生化特征 琼脂糖凝胶电泳 原位末端标记技术 3.流式细胞仪检测法 细胞凋亡的诱导 1.电离辐射 2.细胞因子 3.抗原和受体 4.免疫效应细胞 细胞凋亡相关因子 Caspase Family 1.结构 死亡受体信号 Bcl-2 family 的结构 Bcl-2蛋白的抑凋亡机理： （1）作为一种抗氧化剂 （2）与Bax结合成异源二聚体 （3）影响细胞钙离子的重新分布 （4）抑制细胞色素c从线粒体释放到胞浆 线粒体 IAP (inhibitor of apoptosis) family * * 主动性；生理性细胞自杀 凋亡激活信号；细胞内通讯；免疫效应子杀伤作用 细胞内信号调节；抑凋亡基因的表达 被巨噬细胞或邻近细胞吞噬、清除，不引起炎症反应 见于单个散在的细胞 细胞皱缩体积减小；膜完整良好；质膜起泡 细胞器基本完好；细胞破裂成凋亡小体 染色质凝缩、边集，呈新月体或环形；核破裂 对活体染料的排斥性；电镜；光镜；核荧光染色（荧光显微镜，流式细胞仪）；原位DNA片段标记 大片段DNA断裂→核小体间DNA断裂（DNA ladder) 被动性；病理性细胞死亡 细胞破坏；细胞损伤；免疫效应子杀伤作用 导致邻近细胞死亡、炎症反应和瘢痕形成 累及大片邻近细胞 细胞肿胀，体积增加；膜损伤，内容物外泻 细胞器（如线粒体和内质网）肿胀；细胞破裂 染色质聚集呈颗粒状；核溶解 活体染料排斥性丧失；电镜；光镜 DNA呈“涂片”状（晚期） 性 质 诱导机制 阻断途径 结 局 形态学特征 范 围 细胞外形 细 胞 质 细 胞 核 甄 别 生化表现 凝胶电泳 细胞凋亡 坏死 ? 流式细胞仪检测细胞凋亡 Caspase (ICE/CED-3 cystein proteinase) family Caspase 1 (ICE) subfamily Caspase 2 (ICH-1) subfamily Caspase 1 (ICE) Caspase 4 Caspase 5 Caspase 3 (CPP32) family Caspase3 (CPP32) Caspase 6 Caspase 7 Caspase 8 Caspase 10 Caspase2 (ICH-1) Caspase 9 图1. Caspase 家族分类 Caspase 激活途径 基因产物 功 能 Bcl2 凋亡抑制剂，可与Bax及Bak结合 Bclx 其L型抑制凋亡，S型促进凋亡，与Bax及Bak结合 Bclw 凋亡抑制剂 Bax 凋亡促进剂，可与BCL2,BCLXL,EIB19K结合 Bak 凋亡促进剂, 可与BCL2,BCLX,EIB19K结合 Bad 凋亡促进剂, 可与BCL2,BCLXL结合 Bid 凋亡促进剂, 可被caspase8酶切调控，高效诱导细胞色素C从线粒体泄漏到胞浆 MCL1 凋亡抑制剂 EIB19K 腺病毒凋亡抑制剂，与Bak和Bax结合 CED9 线虫中的凋亡抑制剂，BCL2的同源物 Bcl-2家族成员 Bcl-2 family Mechanism of Cyto