生物化学实验二教案分析.ppt

A. 样品的浓缩效应 缓冲液成分及pH的不连续性 浓缩胶pH6.7 缓冲液 浓缩胶Tris-HCl, 电极缓冲液Tris-Gly 解离度 ：?Cl ?蛋 ? Gly mcl?cl m蛋?蛋 m Gly ?Gly 凝胶中Cl－为快离子， Gly－为慢离子，蛋白质样品被夹在中间。 缓冲液成分及pH的不连续性导致蛋白质样品浓缩效应示意图 快离子 慢离子 蛋白质样品 电位梯度的不连续性 E：每厘米的电压降 E＝I 电流强度 /? 电导率 E与电泳速度成正比 电泳开始后，由于快离子泳动率最大，在快离子后面形成一个离子浓度低的低电导区，产生较高的电位梯度，使蛋白质和慢离子加速移动，蛋白质样品被进一步浓缩。 电位梯度的不连续性 E：每厘米的电压降 E＝I 电流强度 /? 电导率 E与电泳速度成正比 电泳开始后，由于快离子泳动率最大，在快离子后面形成一个离子浓度低的低电导区，产生较高的电位梯度，使蛋白质和慢离子加速移动，蛋白质样品被进一步浓缩。 A. 样品的浓缩效应 四个不连续性造成样品浓缩效应原理包括： 缓冲液成分及pH的不连续性 电位梯度的不连续性 A. 样品的浓缩效应 四个不连续性造成样品浓缩效应原理包括： 凝胶层的不连续性： 样品进入浓缩胶有一个堆积浓缩效应 缓冲液pH8.3 蛋白质从“－”极向“＋”极移动，从浓缩胶进入分离胶，速度变慢，堆积浓缩。 A.