5.3DNA粗提取和鉴定讲义.pptVIP

人教版选修1 专题5 DNA和蛋白质技术 课题3 血红蛋白的提取和分离 一、基础知识： （一）蛋白质提取和分离原理 （二）蛋白质提取和分离的方法 1、凝胶色谱法：又称分配色谱法 2、电泳法 （三）缓冲溶液 蛋白质提取与分离的依据－－ 蛋白质的物理化学性质差异： 1.分子的形状、大小 2.电荷性质和多少 3.溶解度 4.吸附性质 5.对其他分子亲和力 实验操作－－实验步骤（P66） 血液组成成分 1.洗 涤 红 细 胞 2.释放血红蛋白 3.分离血红蛋白 4.透析血红蛋白 样品处理 和粗分离 纯 化 纯度鉴定 1.凝胶色谱法 1）原理： 2）材料：凝胶 大分子通过多孔凝胶颗粒的间隙，路程短，流动快； 小分子穿过多孔凝胶颗粒的内部，路程长，流动慢。 凝胶是微小的多孔性球体，如葡聚糖或琼脂糖。内部有许多贯穿的通道. 根据相对分子质量的大小分离蛋白质的方法 概念： 洗脱：从色谱柱上端不断注入缓冲液， 促使蛋白质分子的差速流动。 混合物 上 柱 洗 脱 大分子流动快 小分子流动慢 收 集 大分子 收 集 小分子 2．凝胶电泳法： 1）原理： 不同蛋白质的带电性质（正电荷或负电荷）、电量、形状和大