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MetabolomicsApproachestoassessingoocyteandembryo.ppt

Process of IVF Hyper ovulation Egg Retrieval Artificial Insemination Embryo Transfer 胚胎质量是指胚胎的种植潜力,胚胎的质量越高,种植潜力越大,成活率高。 Assessment of oocyte and embryo quality 形态学评估 代谢组学技术的评估 Morphological assessment 评估对象:胚胎卵裂速度 ,细胞碎片,内细胞群的位置和细胞数量 优点:快速,方便,价格低廉 缺点:缺乏合适的统一的标准,胚胎内部的缺陷不可以检测出来,不易观察(胚胎移植在桑椹胚和囊胚期间进行移植,而在此之前的细胞形态,细胞数量等均不易观察) Metabolomic assessment 内容:代谢物靶向分析(分析分析单一的确定的代谢产物),代谢物的程序性概要分析(分析一组确定的代谢产物和代谢中间产物),代谢物组分析(某一生理或者发育阶段的所有的低分子代谢物) 优点:分析的是细胞代谢之后的终产物,因而更可以清楚的反应胚胎各个方面的特征。 代谢组学分析 1、终止代谢(快速冷冻法) 2、代谢物的提取和分离 3、代谢物的检测、分析与鉴定平台 4、生物信息学平台分析结果(主成分分析法(PCA)) Metabolomic assessment of oocyte andembryo quality Assessment of oocyte quality Assessment of embryo quality Multi-centre study Metabolomic assessment of oocyte quality 卵子的质量对决定受精后的发育起着重要的作用 Thomas及其同事利用FT-IR色谱研究窦卵泡液中成分,获得生物化学指纹图谱,发现从大的成簇的窦状卵泡获得的图谱多有一定的相似性,而小的异源的窦状卵泡的图谱反映了其成熟期 卵子的发育竞争力与卵泡液之间的关系需要进一步确定 Metabolomic assessment of embryo quality Amino acids metabolism Fatty acid metabolism Glycolytic activity Amino acids metabolism HPLC分析移植后的培养基发现:Asp,Gly,Leu在其中所占的分数与移植是否成功有明显的相关性。 这种方法可以和传统的评估方法结合,以增加选择有竞争力的胚胎的机率。 Fatty acid metabolism 研究发现:4细胞阶段之前的胚胎具有高的饱和脂肪酸的浓度,而4细胞之后的胚胎则具有更高的不饱和脂肪酸的浓度。由此,脂肪酸可能有助于增加试管婴儿的成功的机率。 Glycolytic activity 研究发现:具有低的糖分解活力的囊胚与具高的糖分解活力的囊胚相比更具活力。 糖分解活力的非侵入式足迹分析已经被用于评估小鼠的胚胎质量,而且发现这种方法可以是移植胚胎的成功率增加40%。 Multi-centre study 用Raman 和 NIR分析受精3天之后进行胚胎转移之后的培养基发现CH, OH 和NH 基团的光谱与移植的成功与否有一定的关系。 用NMR,Raman 和 NIR,分析了 228 胚胎培养基,,72FF和133 精液,然后利用波长选择性的遗传算法确定了R–OH, CH, OH 和NH 基团的氧化应激生物标志物 以上研究显示废弃胚胎培养基,FF和精液的图谱和胚胎转移成功与否有明显的相关性 Perspectives 将来可能利用多余的废物(培养基和卵泡液)来进行胚胎和卵子质量的预测 可以分析出胚胎内部的缺陷,但又不会影响胚胎的发育和移植的成功率 * * Metabolomics: Approaches to assessing oocyte and embryo quality 崔仕超

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