第七章生物膜与跨膜转运详解.ppt

生物膜与跨膜转运 大纲 7.1 总述 7.2 细胞膜的分子组成 7.3 膜的超分子结构 7.4 溶质的跨膜转运 7.5 细胞膜与跨膜转运相关文献讨论 7.1 总述 7.1 总述 细胞膜的的功能： 确定细胞及细胞内各个细胞器的边界，隔离细胞过程与成分。 调控细胞及细胞器的分子运输。 保存细胞能量。 细胞通讯（受体等）。 7.2 细胞膜的分子组成 1. 脂类（25%-70%） 磷脂 磷脂酰胆碱、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇等。 胆固醇 糖脂 2. 蛋白质（30%-75%） 整体膜蛋白，外周膜蛋白，脂锚定蛋白 3. 碳水化合物（糖类）（~10%） 糖蛋白和糖脂 4. 少量的核酸，水分、无机盐 7.2 细胞膜的分子组成 7.2 细胞膜的分子组成 7.3 膜的超分子结构 7.3 膜的超分子结构 细胞膜的脂双分子层： 两性脂分子在水中自动形成的聚集形态：微团，脂双层（4-5 nm），脂质体； 稳定但是灵活 半透性 脂双层同时具有液体（快速分子移动）和固体的特性。脂双层是二维的液体。 7.3 膜的超分子结构 7.3 膜的超分子结构 生物膜双层脂分子分布的不对称性： 7.3 膜的超分子结构 7.3 膜的超分子结构 膜脂的运动： 流动性 不饱和脂肪酸、固醇。 侧向扩散 同一分子层，相对于其他脂分子的运动 液、晶两性：在垂直于双分子层的维度里，有高度的规律性；在双分子层平面里，有极大的流动性。 翻转运动 概率小，需能，翻转酶可促进 旋转运动 交换 脂肪链的运动 7.3 膜的超分子结构 生物膜的流体镶嵌模型 [Singer Nicholson (1972), Science 1972 Feb. 18 175:23 720-731] 描述了蛋白质与脂双层的关系； 膜蛋白好像液体脂分子海洋中的圆形冰山； 整体蛋白跨越脂双层，通过疏水作用结合在膜上； 外周蛋白与膜表面松散地结合（如：通过静电作用）； 脂锚定蛋白：在膜内或膜外，共价结合在脂上。 7.3 膜的超分子结构 7.3 膜的超分子结构 膜蛋白的侧向扩散： 有些蛋白可自由侧向扩散（人细胞与小鼠细胞的融合实验）； 有些膜蛋白在细胞或细胞器膜上形成聚集物或补丁，这些蛋白分子被一些内部结构锚定，之间相对不动，如：血型糖蛋白，氯离子-碳酸氢根交换蛋白。 7.3 膜的超分子结构 膜蛋白的定位： 电镜观察冰冻撕裂膜； 不能跨膜的试剂进行研究： 异乙基乙酰亚胺 蛋白酶 7.3 膜的超分子结构 7.3 膜的超分子结构 7.3 膜的超分子结构 外周蛋白： 通过弱静电作用结合到膜蛋白或脂分子上 用高浓度的盐溶液可溶 与膜的结合是动态的：临时的，可调控的 例如：膜内侧的磷脂酰丝氨酸（带负电荷的磷脂）可以与含有赖氨酸和精氨酸的血型糖蛋白结合 例如：红细胞的血影蛋白可以支撑细胞膜并使膜蛋白条理化 7.3 膜的超分子结构 7.3 膜的超分子结构 7.3 膜的超分子结构 7.3 膜的超分子结构 7.3 膜的超分子结构 通过磷脂酰肌醇的糖衍生物（GPI）共价连接： GPI 是细胞膜外层的脂 ； 最初是通过研究一种磷脂酶发现的。 通过内膜上的碳氢链（CH2）共价连接，如：Scr蛋白和Ras蛋白。 7.3 膜的超分子结构 膜整体蛋白： 融入脂双层的两亲性蛋白； 特定片段的初级结构高度亲脂： 通常是? -螺旋，与质膜的脂肪酸尾部结合； 一般有20-30个连续的亲脂性氨基酸 有单个或多个跨膜片段； 多种跨膜通道蛋白，如：细菌视紫红质。 7.3 膜的超分子结构 7.3 膜的超分子结构 7.3 膜的超分子结构 7.3 膜的超分子结构 7.3 膜的超分子结构 整联蛋白（Integrins）： 异二聚体； 不同的α和β亚基结合会产生多样的特异性； 与整合蛋白结合的蛋白存在RGD序列； 功能：粘合分子，受体，信号转导蛋白。 钙粘着蛋白（Cadherins): 嗜同种相互作用。 7.3 膜的超分子结构 免疫球蛋白类似蛋白（Immunoglobulin-like proteins): 嗜同种相互作用; 嗜异种相互作用。 选择蛋白（Selectins）： 在Ca2+存在下，结合临近细胞表面特异多糖。 血细胞，血管内皮细胞。 7.3 膜的超分子结构 诸多细胞过程涉及膜融合：外排作用、内吞作用、细胞分裂、精卵细胞融合、膜包被病毒进入宿主细胞。 7.3 膜的超分子结构 特异膜融合的要求： 1）互相识别； 2）并列靠近； 3）双分子层结构局部打破； 4）两个双分子层融合形成连续双分子层； 5）对特异信号响应。 7.3 膜的超分子结构 7.3 膜的超分子结构 细胞杂交： 诱导细胞融合的方法：生物方法（病毒）；化学方法（聚乙二醇PEG）；物理方法（电击和激光）。 应用：植物育种，单克隆抗体制备等。 7.4 溶质的跨膜