第10章吸光光度解析.ppt

 三、 光吸收的基本定律——朗伯一比耳定律 1. 朗伯－比耳定律 实践证明：在分光光度法测量中，若入射光为单色光，则溶液对光的吸收程度仅与溶液的浓度和液层的厚度有关，描述它们之间定量关系的定律是朗伯－比耳定律。? A = Kbc 其物理意义是：在一定温度下，一束平行的单色光通过均匀的非散射的溶液时，溶液对光的吸收程度与溶液的浓度及液层厚度的乘积成正比。 A = abc （c：g·L－1，b：cm，K用a表示，其单位为L·g－1·cm－1，a称为质量吸光系数 ） A =εbc （c：mol·L－1，b：cm，K用ε表示，其单位为L·mol－1·cm－1，ε称为摩尔吸光系数 ） ε越大，反应越灵敏,可测定组分的浓度也越低。一般认为ε＜104的显色反应属低灵敏度，在104～5×104时属中等灵敏度, 在6×104～105时属高灵敏度, ＞105属超高灵敏度。 质量吸光系数a:当一定波长的单色光，通过浓度为1g/L，吸收池的液层厚度为1cm的溶液时，测得的吸光度。单位为L.g-1.cm-1 4、偏离朗伯—比耳定律的因素 显色反应一般可表示为： M + R ? MR (被测组分) (显色剂) (有色化合物) 二、分光光度计 作用：提供能量，激发被测物质分子，使之产生电子谱带 要求 ：发射足够强的连续光谱，有良好的稳定性及足够的适用寿命 类型：可见与近红外区：钨灯 400~1100nm 紫外区：氢灯或氘灯180~400nm (3)吸收池 (4)检测系统 吸光光度仪器的一般操作程序 a.选合适的波长作为入射光，接通电源预热仪器。 b.调透光率为零，即仪器零点。光路应断开，光电转换元件不应受光，显示系统显示T%=0.0，如不在“0”处，则应调节到“0”。 c.调T%=100.0 。将参比溶液置于光路，接通光路(盖上吸收池暗箱盖)，显示系统显示T%= 100.0 。2、3步应反复调整。 d.将样品溶液推入光路，读取吸光度A。溶液的吸光度应控制在0.2～0.8范围内，使测定结果有较高的准确度。而当A=0.434或T%=36.8时，测定的误差最小。过大或过小应予以调节。 e. 整理好仪器。 §10－4 吸光光度法的应用 2.工作曲线法（标准曲线法 ）适用于经常性的、大批试样的分析 以A为纵坐标，标液的浓度c为横坐标作图，得到一条通过原点的直线，称为工作曲线或标准曲线。 再在相同条件下用相同方法配制样品溶液，并测出其吸光度Ax，在工作曲线上即可查得相应的浓度cx。 注意：待测样的测定结果应在工作曲线范围内，不能延长工作曲线；工作曲线也只能在同一次测定中应用。 分光光度计 三、吸光光度法测量条件的选择 1、入射光波长 a.最大吸收波长；b.能避开干扰组分的入射光波长 测量条件 2、参比溶液 溶剂空白：试液及显色剂均无色 试样空白：被测试液中存在其他有色离子 试剂空白：显色剂有色，而试液本身无色 如果显色剂和试液均有颜色，可将一份试液加入适当掩蔽剂，将被测组分掩蔽起来，使之不再与显色剂作用，而显色剂及其他试剂均按试液测定方法加入，以此作为参比溶液，这样可以消除显色剂和一些共存组分的干扰。 3、吸光度范围 被测溶液的吸光度值在0.2～0.8范围内，使测定结果有较高的准确度，过大或过小应予以调节。 而当A= 0.434或T% = 36.8时，测定的误差最小。 为此可从以下三方面加以控制： 一是改变试样的称样量，或采用稀释、浓缩、富集等方法来控制被测溶液的浓度； 二是选择适宜厚度的吸收池； 三是选择适当的显色反应和参比溶液。 即 单一组分分析 1.比较法（只有几个样品溶液需要分析，而精度要求又不很高，常采用比较法测定。） 则 标准溶液 待测溶液 工作曲线 无机及分析化学 * 本章主要介绍可见分光光度法的基本原理、仪器的基本结构和有关应用。 第十章 吸光光度分析法 1、熟悉吸光光度法的特点； 2、掌握吸光光度法的基本原理及适用范围； 3、了解吸光光度法的分析方法以及显色反应和显色条件的选择； 4、了解吸光光度法仪器构造及测量条件的选择。 学习要求 §10－1 吸光光度法的基本原理 二、物质对光的选择性吸收 三、朗伯—比耳定律 四、偏离朗伯—比耳定律的原因 §10－3 光度分析法及其仪器 一、目视比色法 二、分光光度法及分光光度计 一、显色反应与显色剂 二、影响显色反应的因素 §10－4 吸光光度法的应用 §10－2 显色反应及其影响因素 一