生物大分子物质的制备 - 南京农业大学.pptVIP

南京农业大学 生命科学学院 南京农业大学 生命科学学院 南京农业大学 生命科学学院 生物化学技术原理及应用 参考资料： 《生物化学技术原理及应用》赵永芳 科学出版社 《生物化学实验原理和方法》余瑞元 北京大学出版社 《生物化学技术》 王小莉 中国轻工业出版社 《现代生化技术》 郭 勇 华南理工大学出版社 《生物化学实验技术原理和方法》 王泽宪 中国农业出版社 互联网 （引用图片） * * 南京农业大学 生命科学学院 目 录 第一章 概述（生物大分子的制备） 第二章 沉淀法 第三章 膜分离技术 第四章 离心技术 第五章 电泳技术 第六章 层析技术 第七章 光谱与质谱 第八章 基因重组与基因分析 第九章 蛋白纯化与蛋白分析 第十章 流式细胞术（专题讲座） * 南京农业大学 生命科学学院 * * 生命科学学院 生物科学51班 * 第一章 概述 引 言 生物化学研究技术与方法 生物大分子物质的制备 1 2 4 引 言 生物化学的概念及其研究内容 生物化学是研究生物体的物质组成和生命过程中的化学变化的一门科学。 或者说生物化学是研究生命现象中的物质基础和化学变化的一门科学。 更简单地说生物化学就是研究生命现象的化学本质。 生物化学就是生命的化学。 * 南京农业大学 生命科学学院 * * 南京农业大学 生命科学学院 * 引 言 生物化学研究的主要目的 从分子水平了解活细胞相关的所有化学进程。 生物化学的研究对象 生物分子的组成成分如碳、氢、氧、氮、磷等化学元素以及水和无机盐代谢。 生物大分子如DNA、RNA、蛋白质、多糖及脂类的结构、功能、结构与功能的关系。 生物大分子的代谢和相互作用。 * 南京农业大学 生命科学学院 * 引 言 生物化学研究的三个主要发展阶段： 叙述生物化学阶段（1770～1903 年）。又称为静态或形态生物化学，研究内容以分析生物体内物质的化学组成、性质和含量为主。 动态生物化学阶段（1903～1950 年）。又称为生理化学。主要研究生物体内组成物质的化学变化及相互转变。 功能或分子生物化学阶段（1950 年至今）。研究生命的本质和奥秘：运动、神经、内分泌、生长、发育、繁殖等的分子机理 。 * 南京农业大学 生命科学学院 * 生物化学研究技术方法 生物化学研究的方法： 观察：生命现象 分离：未知蛋白组分，新基因片段，新的次生代谢物。 （抽提、过滤、离心、色谱） 分析： 结构与性质（序列分析，X-射线晶体衍射，核磁共振，波谱，质谱等） 功能（实验设计与方法） 代谢及其细胞调控 改造及利用 * 南京农业大学 生命科学学院 * 分离 生命现象 生化组分 分析 1、结构与性质 2、功能 3、代谢及其细胞调控 改造利用 生物化学研究技术方法 经典的研究步骤： 分离生化组分（细胞器和生物分子）； 分析生化组分的结构； 分析生化组分的功能和代谢（合成与分解）及其相互作用。 * * 南京农业大学 生命科学学院 生物化学研究技术方法 生命科学是一门实验的科学，其发展有赖于实验技术的进步。 生物化学研究自进入分子生物化学阶段以来，生化研究实验技术飞速发展，特别是近20年来，生物化学新技术、新方法不断涌现，为生化研究工作者提供了有用的工具。 * 南京农业大学 生命科学学院 * 生物化学研究技术方法 生物化学研究技术： 分离技术：沉淀、吸附、膜分离（过滤、透析等）、离心、层析、电泳等； 分析检测技术：电泳、层析、光谱、质谱、电化学技术、分子标记等。 分子生物学研究技术：基因重组、分子杂交、PCR与反转录、核酸测序、免疫技术、生物芯片等等。 * 南京农业大学 生命科学学院 * 生物化学研究技术方法 研究技术的选择： 实验的目的：定性分析与定量分析； 分离或分析物的物理化学性质； 研究技术的精确性、准确性及检测限； 研究成本； 潜在的风险与危害。 * 南京农业大学 生命科学学院 * 生物大分子物质的制备 生物大分子的制备 生物大分子的制备过程包括选材、细胞破碎和细胞器分离、生物大分子提取纯化、以及样品浓缩干燥和储存等。 生物材料的选择 细胞的破碎 生物分子的抽提 生物分子的浓缩 有效成分纯度和性质分析 * 南京农业大学 生命科学学院 * 生物大分子物质的制备 * 南京农业大学 生命科学学院 * 生化物质通常是指动物、植物和微生物进行新陈代谢时产生的蛋白质（包括酶）和核酸等有机化合物。 这些大分子物质在生物体内具有各种生