免疫学应用详解.ppt

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抗 原 抗 体 反 应 抗原抗体反应 antigen-antibody reaction 概念 基本原理 特点 影响因素 应用范围 一 概念 抗原和抗体的特异性结合反应 体内 产生保护效应 造成病理损伤 体外 多种表现形式:凝集,沉淀,补体结合,中和等. 二 基本原理 抗原和抗体分子结构及立体构型的互补 抗原-抗体结合力 疏水作用,氢键,范德华引力,静电吸引作用 三 特点 特异性 可逆性 一定条件下(低pH、高浓度盐、冻融等) →抗原-抗体可被解离 最适比例 反应体系中抗原/抗体最适比例 →决定反应结果的关键因素 四 影响因素 (一) 反应物自身因素 1. 抗体 * 来源 * 特异性与亲和力 * 浓度 2. 抗原 * 理化性质、表位多寡和种类 (二) 环境条件 1. 电解质 不可缺少 2. 酸碱度 pH 6-9 3. 温度 15-40度 4. 时间 规定时间 五 应用范围 用已知抗原检测未知抗体 用已知抗体检测未知抗原 大分子物质 药物、激素和炎性介质等各种半抗原物质 免疫沉淀反应(precipitation) 原理 可溶性抗原+抗体 ?白色沉淀 内容 单向定量免疫电泳(火箭电泳) 琼脂糖双向免疫扩散 * 单向定量免疫电泳(火箭电泳) 抗体+琼脂?琼脂板 ? 打孔数个(孔与板缘距离1cm) ? 加入样品(由低浓度到高浓度) ? 电泳 火箭电泳 * 琼脂糖双向免疫扩散 铺制琼脂糖凝胶板 ? 打孔(梅花型) ? 中心孔内加入抗IgG血清,其余加入待检血清 ? 湿盒内37度温育24h 凝集反应(agglutination) * 原理 颗粒性抗原(细菌、红细胞等)与相应抗体结合 →肉眼可见的凝集物 * 方法 直接凝集、间接凝集、间接凝集抑制试验 间接凝集抑制试验 * *

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