蛋白质纯化技术(上)教程.ppt

A Brief View of Protein Purification A Brief View of Protein Purification 概 述 ? 蛋白质的分离纯化是研究蛋白质结构、化学组成和生物功能的基础。蛋白质在自然界中存在于复杂的混合体系中，而且许多重要的蛋白质在细胞中的含量极低。 要把蛋白质从复杂的体系中分离出来，同时又要防止其组成、结构的改变和生物活性的丧失，显然是有相当难度的。 概 述 细胞破碎 蛋白溶解 酸、碱 醇 去垢剂 尿素 …… 粗 提 沉淀 相分离 分子筛 …… 精 提 各种色谱 电泳分离 差速离心 …… 研磨 超声 渗透压 酶 …… 保 存 预处理 原材料的获取 浓缩 保存状态 保存条件 保存期限 …… 原材料的获取 动物 植物 培养物 预 处 理 材料的收集 ?过滤 ?离心 颗粒化处理 ?剪切 ?研磨 预 处 理 离 心 ? A 19th century hand cranked laboratory centrifuge. 离心是利用离心力，分离液体与固体颗粒或液体与液体的混合物中各组分的方法。  预 处 理 粒子在离心场中的运动速度： 离心加速度： 离心分离因数： Fr≤3500 常速离心 Fr=3500~50000 高速离心 Fr50000 超速离心 预 处 理 rpm与g的换算 （r,