电泳的步骤概念.pptVIP

SDS鉴定菠萝蛋白酶的纯度 一、实验目的 1、学习和掌握电泳（SDS）的基本原理及电泳技术。 2、熟练配制SDS相关各种试剂。 二、实验原理 电泳:带电粒子在电场中向与其自身带相反电荷的电极移动，这种现象称为电泳。 影响电泳的主要因素 （1）颗粒性质：一般说来，颗粒带净电荷量越大，或其直径越小，或其形状越接近球形，在电场中的泳动速度就快。反之，则越慢。 （2）电场强度：电场强度越高，带电颗粒的泳动速度越快。反之，则越慢。 （3）pH值 （4）离子强度：溶液的离子强度一般在0.02～0.2mol/kg之间电泳较合适。 （5）溶液粘度 （6）电渗 （7）焦耳热 （8）筛孔 聚丙烯酰胺凝胶电泳是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持物的一种电泳。 这种凝胶是由丙烯酰胺单体(简称 Acr)和交联剂 N，Nˊ-甲叉双丙烯酰胺(简称Bis)，在催化剂的作用下聚合而成的。 聚丙烯酰胺凝胶聚合的体系有两种，即化学聚合和光聚合。 化学聚合的引发剂是过硫酸铵[(NH4)2S2O3](简称Ap)，催化剂是N，N，Nˊ，Nˊ-四甲基乙二胺(TEMED)。在催化剂TEMED的作用下，由过硫酸铵(Ap)形成氧的自由基，后者又使单体形成自由基，从而引起聚合作用。 聚丙烯酰胺凝胶的质量主要由凝胶浓度和交联度决定。 每100mL凝胶溶液中含有的单体(Acr)和交联剂(Bis)总克数称为凝胶浓度，用T％表示。 凝胶溶