苏振峰答辩研究报告.ppt

壳聚糖、海藻酸钠、百里香酚对灵武长枣采后主要病原菌抑菌效果的研究 答辩人：苏振峰 学 号：座机电话号码 指导老师：任玉锋 主要内容 一、研究的意义 二、研究的内容 三、研究的方法 四、结果与分析 五、结论 六、致谢 一、研究的意义 壳聚糖﹑百里香酚﹑海藻酸钠对食品中常见的腐败菌都具有一定的抑菌作用，可作为天然食品防腐剂的重要成分。灵武长枣是宁夏灵武有地方特色的优良枣树品, 其个大、色泽艳丽、果肉致密酥脆、酸甜适口、汁液较多,鲜枣含糖量250～300 g/kg ,Vc含量达3～4 g/kg,是集营养、保健于一体的优质果品,目前已成为宁夏最热销的水果之一。灵武长枣在贮藏中因真菌病害浸染而导致的腐烂率达30%～40%。随着灵武长枣栽种面积的不断扩大,枣果产量逐年增加,市场销售的压力将会逐年加大,这将严重制约灵武长枣产业的快速发展。因此，研究采后病害的种类及其防治方法,是灵武长枣贮藏保鲜技术中一项亟待解决的主要问题,已成为产业发展的关键。 本文研究以宁夏灵武长枣在贮藏过程中所分离的四种病原真菌——链格孢、粉红聚端孢、青霉属、黑根霉为研究对象，用滤纸片扩散法等方法，研究壳聚糖﹑百里香酚﹑海藻酸钠3种保鲜剂对这四种病原真菌的抑制效果。以延长灵武长枣的贮藏期，为宁夏灵武长枣产业的发展做出我们的贡献。 二、研究的内容 （一）壳聚糖、海藻酸钠、百里香酚溶液对供试菌抑 菌效力的影响 （二）壳聚糖、海藻酸钠、百里香酚溶液的MIC （三）壳聚糖、海藻酸钠、百里香酚溶液不同pH对供试菌的抑菌活性影响 三、研究的方法 （一）滤纸片扩散法：将滤纸用打孔器制成直径为6mm的圆片，灭菌锅灭菌30min。把灭菌后的滤纸片放入壳聚糖、海藻酸钠、百里香酚、壳聚糖-百里香酚和海藻酸钠-百里香酚溶液中浸泡一小时，然后干燥备用。分别吸取四种供试菌悬液100μl，加入培养基中并涂布均匀。用无菌镊子将药液浸泡过的滤纸片分别放入含有菌的培养皿中，每皿均匀放三片，每处理做三个重复，放入25℃-28℃的恒温培养箱中培养24-72h，量取抑菌圈直径，结果取三皿的平均值，比较壳聚糖、海藻酸钠、百里香酚、壳聚糖-百里香酚和海藻酸钠-百里香酚对各种实验真菌的抑菌效力，用无菌水做对照组。 （二）测定壳聚糖、海藻酸钠、百里香酚、壳聚糖-百里香酚和海藻酸钠-百里香酚对4种供试菌的最低抑菌浓度。 壳聚糖的浓度为2%、1.0%、0.5%、0.25%、0.125%、0.0625%、0.03125%、0.015625%的培养基； 海藻酸钠的浓度为2%、1.0%、0.5%、0.25%、0.125%、0.0625%、0.03125%、0.015625%的培养基； 百里香酚的浓度为2%、1.0%、0.5%、0.25%、0.125%、0.0625%、0.03125%、0.015625%的培养基； 壳聚糖-百里香酚的浓度为2%、1.0%、0.5%、0.25%、0.125%、0.0625%、0.03125%、0.015625%的培养基； 海藻酸钠-百里香酚的浓度为2%、1.0%、0.5%、0.25%、0.125%、0.0625%、0.03125%、0.015625%的培养基； 待培养基凝固后，用无菌打孔器打孔,孔径为5mm，之后每个浓度用菌饼反贴法分别接入4种供试菌，培养24-72h，观察其生长，测定菌落的直径。 （三）用1mol/L盐酸或1mol/L氢氧化钠溶液将壳聚糖、海藻酸钠、百里香酚、壳聚糖-百里香酚和海藻酸钠-百里香酚分别调制成pH为4.4、5.4、6.4、7.4，制成平板后分别吸取四种供试菌悬液100μl，加入培养基中并涂布均匀，用无菌镊子将上述不同pH的药液浸泡过的滤纸片分别放入含有菌的培养皿中，每皿均匀放三片，每处理作三个重复，每个pH用无菌水作对照，然后放入25℃-28℃的恒温箱中培养，培养24-72h，观察结果，测定抑菌圈直径，比较不同pH条件下,对供试菌的影响。 四、结果与分析 4.1 壳聚糖、海藻酸钠、百里香酚的抑菌效力 由表4.1可知，以上五种溶液对4种供试菌都有不同程度的抑制作用 ，对同一种供试菌而言，壳聚糖-百里香酚混合液的抑菌效力最好，海藻酸钠最差；由五种溶液对4种供试菌的抑制效力来看，黑根霉最难抑制 ，其次是青霉属、链格孢较难抑制，粉红聚端孢是最容易抑制的 。 注：-表示没有菌生长；+表示5mm≤菌落直径 15mm；++表示15mm≤菌落直径 25mm；+++表示25≤菌落直径 35mm；++++表示35≤菌落直径 45mm；+++++表示45≤菌落直径 55mm；++++++表示55≤菌落直径 65mm；+++++++表示65≤菌落直径 75mm；++++++++表示长满菌落。 下表4.3、4.4、4.5、4.6同上 4.2 壳聚糖、海藻酸钠