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重组人白介素-18 rhIL-18 基因工程菌的构建 分子生物学实验-实验操作 基因、载体、受体菌株 实验技术要求 应掌握的实验技术 酶切,连接 凝胶回收 制备感受态细胞 质粒提取 PCR 琼脂糖凝胶电泳 考察指标 电泳、蓝白斑数量 电泳 感受态细胞转化率 电泳 电泳 电泳 实验流程: 第一天 8AM-5PM 实验流程: 第二天 8AM-5PM 实验流程: 第三天 1PM-5PM 实验流程: 第四天 8AM-5PM 双酶切反应（20μL体系） rhIL-18的PCR产物 目的基因 6.8μL 无菌水 9μL BSA 0.2μL BglⅡ 2μL PstⅠ 2μL 质粒pUC18 质粒 10μL 无菌水 6μL BamHⅠ 2μL PstⅠ 2μL Hybrid site 培养基配制 LB液体培养基 每1L配量： 蛋白胨 10g 酵母提取物 5g 氯化钠 5g 滴加0.2mL 5mol/L NaOH ，调节pH值至7.0 LB固体培养基: 每100ml液体培养基添加1.5g琼脂 每组准备： 3个30ml 液体培养基 120ml 固体培养基 灭菌 5个培养皿 3个30ml LB 液体培养基 1个120ml LB 固体培养基 一个50ml 离心筒 微量移液器枪头 琼脂糖电泳 琼脂糖凝胶电泳是分离鉴定和纯化DNA 片段的标准方法。 DNA 的分子大小 琼脂糖浓度