ISSR(intr-simple sequence repeat)分子标记的实验原理及操作流程.docVIP

ISSR（inter-simple sequence repeat）分子标记的实验原理及操作流程 ISSR（inter-simple?sequence?repeat）标记是一种类似RAPD，但利用包含重复序列并在?3’或5’锚定的单寡聚核酸引物对基因组进行扩增的标记系统，即用SSR引物来扩增重复序列之间的区域。其原理具体是，ISSR标记根据生物广泛存在?SSR的特点，利用在生物基因组常出现的SSR本身设计引物，无需预先克隆和测序。 关键词：标记分子ISSRinter-simplesequencerepeatSSR引物RAPD分子标记单寡聚核酸 ISSR标记 ISSR（inter-simple?sequence?repeat）标记是一种类似RAPD，但利用包含重复序列并在 3’或5’锚定的单寡聚核酸引物对基因组进行扩增的标记系统，即用SSR引物来扩增重复序列之间的区域。其原理具体是，ISSR标记根据生物广泛存在 SSR的特点，利用在生物基因组常出现的SSR本身设计引物，无需预先克隆和测序。用于扩增的引物一般为16-18个碱基序列，由1-4个碱基组成的串联重复和几个非重复的锚定碱基组成，从而保证了引物与基因组DNA 中SSR的5’或3’末端结合，导致位于反向排列、间隔不太大的重复序列间的基因组节段进行PCR扩增。 ? 一、实验材料 　　不同来源的 DNA(30-50ng/ul)