5--1DNA的粗提取与鉴定解决方案.ppt

* 专题5 DNA和蛋白质技术 一、基础知识 1.提取生物大分子的基本思路 选用一定的物理或化学方法，分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。 2.提取DNA的基本思路 利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。 1、 DNA和蛋白质等在不同浓度的NaCl溶液中溶解度有何特点？ （一）DNA的溶解性 2、分离原理 当NaCl的物质的量浓度为0.14 mol／L时,DNA的溶解度最低。利用这一原理，可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。 （1）DNA不溶于酒精溶液，细胞中的某些物质则可溶于酒精。 3、DNA在酒精溶液中的溶解性 （2）提纯的原理： 将DNA与蛋白质进一步分离 （二）DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性 ① 蛋白酶:水解蛋白质，对DNA没有影响。 ② 高温:大多数蛋白质不能忍受60－80°C，而DNA在80°C以上才会变性。 ③ 洗涤剂:溶解细胞的细胞膜，去除脂质和蛋白质,但对DNA没有影响。 试剂： （三）DNA的鉴定 条件： 二苯胺 沸水浴条件下，DNA遇二苯胺被染成蓝色。 沸水浴 现象： （一）实验材料的选取 （二）破碎细胞，获取含DNA的滤液 （三）除去滤液中的杂质(纯化) （四） DNA的析出与鉴定 二、实验设计 二、DNA的粗提取与鉴定的实验设计 （一）实验材料的选取 思考:原