成都医学院卫生检验与检疫专业免疫学检验重点.docVIP

免疫（immunity）：是机体对抗原性异物的识别和应答，是机体识别和消除抗原性异物的重要手段。 免疫系统：由免疫器官，免疫细胞及免疫分子组成。 免疫器官有：中枢免疫器官--骨髓，胸腺。外周免疫器官--淋巴结，脾脏。 免疫细胞：1.淋巴细胞（Tcell,Bcell,NKcell），2.单核巨噬细胞（血液中的单核细胞和组织中的巨噬细胞），3.参与免疫应答的细胞（中性粒，嗜酸，嗜碱粒，肥大细胞）。 抗体：（antibody,Ab）是体液免疫应答产生的主要效应分子，由B淋巴cell或记忆B淋巴cell经抗原刺激后增殖分化成的浆细胞产生，主要存在于血清等体液中。 补体：（complement,C）是存在于血清、组织液和细胞表面的经活化后的有酶活性的蛋白质，包括30余种可溶性蛋白和膜结合蛋白，故统称为补体系统 细胞因子：（cytokine,CK）是细胞分泌的具有生物活性的小分子蛋白物质的总称。 免疫应答反应：1.固有免疫，2.适应性免疫 抗原表位（epitope）:是指存在于抗原分子表面的，能与T/B细胞抗原受体或抗体特异性结合，决定抗原特异性的特殊化学基团。 半抗原（hapten）：仅能与相应的抗体发生特异性结合反应，但不能单独诱导机体产生抗体。 人工抗原：由大分子物质（称为载体）和半抗原组成的抗原。 共同抗原表位：不同抗原之间存在的相同或相似抗原表位。共同抗原：具有共同抗原表位的不同抗原 交叉反应：如果甲乙两种抗原是共同抗原，那么由甲抗原刺激机体产生的抗体，不但能够与甲抗原上相应的抗原表位发生特异性结合，而且能够和乙抗原上相同的抗原表位结合的现象。 免疫球蛋白的基本结构：由两条重链和两条轻链通过二硫键结合而成的Y字形双边对称结构，称为Ig单体。 可变区：在Ig近N端轻链1/2和重链1/4(γ链、α链、б链)或1/5（μ链，ε链）区域内（约110个氨基酸），氨基酸的组成和序列变化比较大。 恒定区：在Ig近C端轻链1/2和重链3/4(γ链、α链、б链)或4/5（μ链，ε链）区域内，氨基酸的组成和序列在同一种属的同一类Ig中相对稳定。 免疫球蛋白的水解片段：意义：1.用于研究免疫球蛋白的结构和功能。2.避免超敏反应。常用的有1.木瓜蛋白酶水解片段（将IgG分子从重链二硫键N端219位置上断裂，生成两个相同的Fab片段和一个Fc片段）。2.胃蛋白酶水解片段（将IgG分子从重链间二硫键C端232位置上断裂，形成一个F（ab）片段和一些无生物活性的小分子多肽碎片pFc片段） 各类免疫球蛋白的特点：IgG：是血清和细胞外液中含量最高的Ig，唯一可透过胎盘传输给胎儿，半衰期最长（23天），出生后3个月开始合成，5岁达成人水平。IgM:是个体发育过程中最早合成和分泌的Ig（胚胎晚期开始合成），是分子量最大的Ig，血型抗体，凝集反应。IgA：分为血清型（单体），免疫作用弱和分泌型（二聚体），在黏膜局部抗感染免疫中发挥重要作用。IgD:是Bcell分化成熟的标志。lgE:是正常人血清中含量最低的Ig，参与Ⅰ型超敏反应，半衰期最短，可能与机体抗寄生虫免疫有关。 抗原抗体反应的特点：1.特异性。2.比例性（在等价带前后分别为抗体过剩或抗原过剩，形成的沉淀物少或无，这种现象在免疫测定中称为“带现象”，出现抗体过量时，称为前带；抗原过剩时，称为后带）。3.可逆性。（抗原抗体复合物解离取决于两方面的因素，一是抗体对相应抗原的亲和力，二是环境因素对复合物的影响）。4.阶段性。 细胞破碎的方法：反复冻融法；超声破碎法；表面活性剂处理法；自溶法；溶菌酶处理法。 抗原的分离和纯化：层析法：1.凝胶过滤层析；2.离子交换层析；3.亲和层析。 蛋白质类载体：常用的有人血清白蛋白（HAS），牛血清白蛋白（BSA），兔血清白蛋白（RSA），牛甲状腺球蛋白（BTG）。 多克隆抗体：（polyclonal antibody）是由机体的多个Bcell克隆产生的针对多个表位的混合抗体。 免疫佐剂（immunaodjuvan）指同抗原一起或预先注射到机体内，能增强机体对该抗原的免疫应答或改变免疫应答类型的非特异性免疫增强性物质，简称佐剂。作用机制：1.改变了抗原的物理形状，降低抗原在体内的分解速度，延长抗原与免疫细胞的作用时间，从而增强抗原的抗原性；2.佐剂对细胞膜有活化作用，可增加巨噬细胞和淋巴细胞的通透性，促进其对抗原的有效处理；3.直接刺激参与反应的细胞，并使之增生，扩大和增强免疫应答能力；4.促进单核/巨噬细胞活化，释放细胞因子，调节和增强淋巴细胞的应答能力。 单克隆抗体（monoclonal antibody,McAb）：是指由一个B细胞系（克隆）所产生的抗体，仅能结合特定抗原的一个表位。 单克隆抗体制备的原理：杂交瘤技术（体外细胞融合技术，获得免疫小鼠脾细胞与恶性浆细胞融合的杂